6%羟乙基淀粉130/0.4 不同输注方式对小鼠的免疫细胞的影响

衣秀娜 张建中 黄绍艳（通讯作者）

（1 烟台山医院麻醉科 山东 烟台 264000）

（2 烟台山医院肿瘤科 山东 烟台 264000）

HES 平均分子量为13 万道尔顿，HES 的分子量呈正态分布并且更加集中，被a-淀粉酶降解的少，对凝血及肝肾功能的影响更小[1]。HES 已经广泛用于各种休克的治疗[2]。但前期研究发现[3]，HES 输入体内后在低年龄组儿童会明显的漏出血管外，这与儿童的血管发育不完善密切相关。HES 在血管内被淀粉酶水解，漏出血管外HES 缺少淀粉酶水解需要巨噬细胞清除，对免疫系统影响需要进一步研究。本研究采用动物实验研究HES 对免疫细胞的影响，比较HES 通过腹腔和静脉方式输入小鼠体内后对免疫细胞的影响，为HES 的临床安全使用提供依据。

1.材料和方法

1.1 材料来源

将体重18 ～22 克成熟雌性的60 只四周龄小鼠随机分为两组，小鼠的血容量约占体重的7.5%，乙醚麻醉后，腹腔和眼静脉输入10%血容量的HES。B 组腹腔内注射输入10%血容量的HES，D 组经眼静脉内注射输入10%血容量的HES。

1.2 方法

输入液体后第1（T0）、7（T1）、14（T2）天分批处死小鼠，检测WBC、LYM、GRN。同时取新鲜的脾组织放研磨器内研磨，200 目筛，PBS 溶液2ml，稀释10 倍，显微镜下细胞计数板数细胞数。白细胞/L=每个大方格内白细胞数×稀释倍数×106个。

1.3 统计学方法

所有数据采用SPSS16.0 统计分析软件分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，组内不同时间点的参数采用单因数方差分析，组间比较采用两组独立样本的t检验，P＜0.05 认为有统计学差异。

3.结果

3.1 两组小鼠血免疫细胞指标的比较

与T0时比较，B、D两组WBC在T1和T2时升高；与T0时比较， B 组LYM 在T1、T2 时降低，D 组LYM 在T2 时升高；与T0 时比较， B 组GRN 在T1 时升高、T2 时降低，D 组GRN 在T1、T2 时降低。与B 组相比，D 组WBC 在T1 时降低、T2 时升高；与B 组相比， D 组LYM 在T0 时降低。与B 组相比，D 组GRN 在T1 降低，见表1。

表1 两组小鼠血免疫细胞指标的比较（±s，×109/L）

表1 两组小鼠血免疫细胞指标的比较（±s，×109/L）

指标 组别 T0 T1 T2 WBC B 14.8±1.7 80.7±6.2ab 45.7±4.0a D 15.6±2.4 32.8±4.1ab 74.5±8.7ab LYM B 13.4±1.2 3.2±0.4ab 3.6±0.5a D 4.5±0.6b 4.6±0.5 6.1±0.8ab GRN B 0.52±0.05 0.85±0.07a 0.22±0.03a D 0.54±0.04 0.44±0.05ab 0.21±0.03a

3.2 两组小鼠脾脏白细胞计数比较

与T0 时比较，B、D 四组脾脏WBC 在T1 和T2 时升高；与B组比较，D 组脾脏WBC 在T1 时减低在T2 时升高，见表2。

表2 两组小鼠脾脏白细胞计数比较（±s，×109/L）

表2 两组小鼠脾脏白细胞计数比较（±s，×109/L）

指标 T0 T1 T2 B 14.8±1.7 80.7±6.2a 45.7±4.0a D 15.6±2.4 32.8±4.1ab 74.5±8.7ab

3.讨论

HES 作为一种大分子物质可以治疗血管毛细血管渗漏，与机械堵漏和抗炎作用有关[4]。本课题组前期研究通过测定HES与白蛋白的相关作用关系[5]，发现HES 输入体内后与白蛋白214位色氨酸结合形成1：1 复合物，体积增大理论上利于HES 在毛细血管综合症患者的机械堵漏。但同时发现HES 在血管内皮损伤患者存在明显的血管外渗漏[3]。本研究比较HES 通过腹腔和静脉方式输入小鼠体内后对免疫细胞的影响，为HES 的临床安全使用提供依据。

本研究结果发现，不同组间和不同时间点的免疫指标存在明显差异，与不同给药方式对机体刺激强度不同有关。从分离的灌注小肠的小鼠模型结果发现[6]，HES损害肠屏障完整性和代谢功能，从而影响免疫细胞。但最新动物研究表明[7]，HES 在小鼠全身和肺部炎症期间降低血管通透性，减弱全身炎症期间血管通透性的增加，改善免疫功能。因此，HES对小鼠的免疫细胞有多方面的影响，因此在临床中对人体的免疫系统的影响需要进一步研究。