前列腺素D2在小鼠溃疡性结肠炎癌变模型中的作用探讨

林艺娟，陈金通，黄循铷，庄则豪，丁 健，王承党

福建医科大学附属第一医院消化内科，福建 福州 350005

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)是一种病因不明、慢性复发性的非特异性结直肠炎症性疾病，以腹痛、腹泻、黏液血便为主要临床表现，可伴肠外表现[1]。UC的结直肠癌变风险比普通人群高60%，晚期预后差。目前多数认为UC相关癌变(ulcerative colitis associated carcinogenesis，UCAC)的发生经历了“炎症-不典型增生-癌症”模式发病[2]。已有研究发现，非甾体类消炎药(non-steroidal anti-inflammatory drugs，NSAIDs)对结直肠癌的发生及发展具有化学预防作用[3]，但不良反应大。前列腺素D2(prostaglandin D2，PGD2)是环氧合酶2(cyclooxygenase 2，COX-2)的下游产物，以其受体作为防治靶点可能不良反应更低。本实验应用经典的氧化偶氮甲烷/葡聚糖硫酸钠(Azoxymethane/Dextran sodium sulfate，AOM/DSS)法模拟小鼠UC癌变模型[4-5]，旨在探讨PGD2在实验性小鼠UC癌变过程中的可能作用及其D类前列腺素受体1(D prostanoid receptor 1,DP1)拮抗剂(BWA868c)作为预防UC癌变的可能应用前景。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物：8～10周龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠40只，体质量18～22 g，购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司[许可证号SCXK(湘)2016-0002]。用混合配方饲料喂养，自由进食饮水，每日更换饮水、饲料，定期更换垫料，保持小鼠生活环境通风和清洁卫生。本研究经福建医科大学附属第一医院伦理委员会批准，课题中所用的动物严格按照批准的研究方案开展研究工作。

1.1.2 主要实验试剂与器材：Azoxymethane(氧化偶氮甲烷，AOM，SLBV4860，SIGMA)；BWA868c(0411898-75，Cayman Chemical Company)；塞来昔布(R77190，Pfizer Pharmaceuticals LLC)；葡聚糖硫酸钠(Dextran Sodium Sulfate Salt Colitis Grade，DSS，Q1733，MP Biomedicals)；Rabbit Polyclonal Anti-COX-2(ab62331，Abcam)；Rabbit Anti-β-catenin(bs-1165R，Bioss)；Rabbit聚合HRP标记抗兔IgG(SV0002，博士德)；5% BSA封闭液(SW3015，Solarbio)；Mouse PGD2 ELISA检测试剂盒(MM-4372MI，酶免)；数字电子称(GS-100，深圳市昊天网络科技有限公司)；BCA蛋白定量试剂盒(BCA Protein Assay Kit)(CW0014S，康为世纪)；精密电子称(FA2104N，上海菁海仪器有限公司)；……