免疫检验中电化学发光免疫分析的应用和结果影响因素

张明

【摘 要】目的：探讨并分析免疫检验中电发光免疫的临床运用以及呈现出的结果情况。方法：分析并研究电极开关在电化学发光中的相关影响情况，对比不同开关的电极的发光效率。结果：观察电化学发光影像，四孔电极的电发化学发光影像下不仅具有四孔发光的特点，其小孔同样也存在发光的情况，Tri-n-propylamine与六水合二氯三联吡啶钌所呈现出的图形较清楚，信噪比为4。结论：免疫检验中电化学发光会受到电极开关的影响而造成不同的发光效率，电化学发光通常集中于边缘位置。

【关键词】电化学发光免疫;免疫检验;影响因素;电化学发光效率

【中图分类号】R447 【文献标识码】A 【文章编号】2095-6851（2020）10--01

本研究共设置了三类形态的电极，即圆片状、螺旋丝状以及四孔状，本文主要将这几类形态电极运用于免疫检验过程中，来检测电化学发光强度与发光图像等相关情况，具体报道如下。

1 临床资料与研究方法

1.1 仪器与试剂

本研究试验所使用的试剂包含了硫酸钾（由郑州统麒化工所生产）、三丙胺（Tri-n-propylamine，由美国Sigma-Aldrich公司所生产）、六水合二氯三联吡啶钌（由Sigma-Aldrich公司所提供）等。二维成像系统则由恒温水泵、ICCD、PC机、ST-130控制器所组成，首先，使用相关控制器（ST-130）进行制冷处理（降低至-40度）之后，将其置于暗箱中，通过光学透镜在ICCD光电阴极成像，由ST-130控制器对数据加以采集并完成传送工作，图像则由winview加以处理。

1.2 电极选择

本研究共选择了三类电极，全部电极都属于定做电极，其中，四孔电极主要是在圆片电极的基础上来钻出一个1毫米直径的小孔所得到，而圆片电极的直径为1.5厘米，最后，以铂丝（给予弯曲处理后）来得到了实验使用的螺旋丝电极。

1.3 实验方法

选择硫酸钾，并以0.1mol/L的剂量对六水合二氯三联吡啶钌进行溶解处理，从而配制成1mmol/L的实验液，在运用的过程中通过磷酸盐进行稀释处理，并且对Tri-n-propylamine以及六水合二氯三联吡啶钌依照1：2的比例加入样品池，两组电压设置为1.25V，运用ICCD成像，同时探测发光的基本强度。

1.4 统计学处理方法

本研究中的全部数据均使用SPSS 20.0的软件来加以处理，同时，本研究中的计量资料则以“”所表示，以“”来检验本文中各数据间呈现出的数据差。统计结果P>0.05，数据差异对比不明显，无统计学比较意义，统计结果P<0.05，代表数据差异对比有统计学意义。

2 结果

观察电化学发光影像，四孔电极与圆片电极都存在边缘发光的情况 ，其中，四孔电极不仅具有四孔发光的特征，同时，它的小孔同样存在发光的情况，在此基础上，Tri-n-propylamine与六水合二氯三联吡啶钌（100mol/L）所呈现出的图像十分清楚，其信噪比为4。

对比发光强度，运用浓度为1amo/1L-1nmo/1L的Tri-n-propylamine与六水合二氯三联吡啶钌分别测试四孔电极的发光体系与圆片发光体系的ECL强度，结果显示，对比圆片电极来说，四孔电极中，其电化学发光强度大约提升了50-90%，运用圆片电极检测Ru（bpy）3Cl2.6H2O的极限值为1fom/L，而运用四孔圆片的电极极限则为1aom/L。

3 讨论：

就当前临床免疫学来看，抗原-抗体特异性结合是其中受到广泛关注的问题，通过电化学发光免疫则能运用此生物特异性完成对复杂生物体系的分析选择。电化学发光免疫分析主要是指光化学发光与免疫检测结合的新型免疫分析法，对比常规化学发光来看，电化学发光免疫分析的标记物存在一定的差异性，它属于电极表面特异性化学发光反应，这是由两个部分所组成的，即化学发光与电发光。对比其它类别免疫分析法来说，电化学发光免疫分析有着较高的检验速度、较高的灵敏度、无任何发射性以及较高的检验范围等特点，电化学发光免疫分析在自动免疫分析前沿技术中以相对较高的稳定度以及操控性在生命科学研究中呈现了良好的发展效益。在如今电化学发光技术中，最为常见的工作电极均以表面光滑的圓片电极为主，由于边缘效应的产生，分布于电极表面的电荷并不均匀，这致使发光集中于工作电极的边缘位置，为此，发光效率相对较低，从而致使极低的探测灵敏度。本研究结果显示，四孔电极中，四孔与小孔均出现了发光的情况，Tri-n-propylamine与六水合二氯三联吡啶钌图形较清晰，信噪比为4，而螺旋状电极呈现出螺旋状的发光效果。电化学发光免疫分析作为一类与时俱进的免疫标记技术为生命科学研究与临床诊断提供了一种有效的检测手段，并逐渐成为免疫分析与DNA分析的前沿方法。

总的来说，电化学发光免疫分析是一类相对快捷、便捷、具有较高灵敏度的免疫检验法，对比表面积进行调整能够有效完成检测范围动态的调整价值。

参考文献

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