迪庆藏猪FUT1 基因遗传变异分析

方 晨 ，胡瑞举，杨明华，张 斌，刘韶娜，郭 飞，黄 英，赵彦光*，赵素梅*

（1.云南农业大学云南省动物营养与饲料重点实验室，云南昆明 650201；2.云南省畜牧兽医科学院，云南昆明 650224）

断奶仔猪腹泻是由多种因素引起的急性、致死性传染病。肠毒素大肠杆菌（Enterotoxigenic Escherichia coli，ETEC）F18 通过黏附于仔猪小肠黏膜上皮细胞的受体蛋白释放肠毒素，引起仔猪断奶前后腹泻和水肿[1]。α（1，2）岩藻糖转移酶基因1（α-1，2-Fucosyltransferase gene，FUT1）是调节大肠杆菌F18 黏附受体表达的一个候选基因，影响仔猪的腹泻和水肿，位于猪6 号染色体的6q11 区段[2]。相关研究表明，FUT1基因与猪的产仔性能、发育性状和腹泻相关[3-9]。

迪庆藏猪是云南省优良的地方品种，位于高原严寒地区，具有耐寒、抗逆性强、肉质优良等特点[10-11]。本实验以迪庆藏猪仔猪为研究对象，采用测序方法检测FUT1基因，并研究分析FUT1基因编码蛋白，为建立地方猪种抗病育种的候选基因及相关遗传标记和分子育种提供一定的理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物 实验于云南省畜牧兽医科学院养猪与动物营养研究所猪场进行，选取113 头35 日龄体重8 kg左右的迪庆藏猪断奶仔猪。

1.2 样品采集 实验猪出生后一天内采集耳组织，并放入装有酒精的2 mL 离心管中，-80℃冰箱保存。

1.3 基因组DNA 提取 参照试剂盒（北京天根生化科技有限公司）说明书提取DNA。采用1% 琼脂糖凝胶电泳检测DNA 质量，核酸浓度检测仪测定基因组DNA浓度，并稀释到50 ng/μL，-20℃保存备用。

1.4 引物设计及合成 根据猪FUT1基因全序列（GenBank登录号：NC_010448.4），用Primer3 在线软件（http://primer3.ut.ee/）设计引物，引物由Invitrogen公司合成（表1）。

1.5 PCR 扩增……