甘肃栽培肉苁蓉的鉴别研究

苏学秀 张富娴 贾存勤 滕泽学 杨丽 陈小娟 杨世琴

【摘 要】 目的：建立甘肃栽培肉苁蓉显微、薄层色谱鉴别方法，为完善其质量控制标准提供依据。方法：采用显微数码成像技术进行了显微鉴别;考察了不同提取方法、展开条件，确定了最佳的薄层色谱条件。结果及结论：对样品进行试验，专属性强;薄层色谱斑点清晰、分离度好，建议作为甘肃栽培肉苁蓉的鉴别依据。

【关键词】 肉苁蓉;甘肃栽培;鉴别研究

【中图分类号】R282   【文献标志码】 A    【文章编号】1007-8517（2021）21-0025-03

Identification of Cultivated Cistanche Deserticola in GansuRovince

SU Xuexiu1 ZHANG Fuxian1 JIA Cunqin2 TENG Zexue1 YANG li1 CHEN  Xiaojuan2 YANG Shiqin1*

1.Baiyin Drug Testing Center， Gansu， Baiyin 730900，China; 2.Gansu Huiqin Biotechnology Co. ， Ltd. ，Gansu， Jingyuan 730600，China

Abstract：Objective to establish a method for the identification of cistanche Deserticola by thin layer chromatography （TLC） . Methods The microscopic identification was carried out by micro digital imaging technique， and the optimum conditions of thin layer chromatography were determined by investigating different extraction methods and development conditions. Results and Conclusion The samples were tested， the specificity was strong， the TLC spots were clear， the resolution was good， it was suggested that the identification of Cistanche Deserticola in Gansu Province.

Key words：Cistanche Deserticola; Cultivation in Gansu; Identification Study

肉苁蓉为常用的滋补中药，具有补肾阳、益精血、润肠通便的功能，常用于治疗肾阳不足、精血亏虚、阳痿不孕、腰膝酸软、筋骨无力、肠燥便秘等[1];具有调节免疫、抗氧化抗衰老、改善记忆[2]、抗病毒抗肿瘤等药理作用[3]，主产于中国内蒙古、新疆、甘肃、宁夏等产区[4]。甘肃栽培肉苁蓉为列当科植物肉苁蓉Cistanche deserticola Y. C. Ma的干燥带鳞叶的肉质茎，又称荒漠肉苁蓉[5]。《中国药典》2015年版一部收载肉苁蓉为列当科植物肉苁蓉Cistanche deserticola Y. C. Ma或管花肉苁蓉Cistanche tubulosa（Schenk）Wight的干燥带鳞叶的肉质茎[1]。为了更好地鉴别甘肃栽培肉苁蓉，本文建立了甘肃栽培肉苁蓉显微、薄层色谱鉴别方法，为鉴别甘肃栽培肉苁蓉提供依据。

1 仪器设备及材料

详见表1。

2 肉苁蓉样品

试验用肉苁蓉是2018年10月及2019年4月在甘肃种植产区酒泉市、张掖市、武威市、白银市采挖的检品，经笔者贾存勤正高级工程师鉴定为列当科植物肉苁蓉 Cistanche deserticola Y. C. Ma的干燥带鳞叶的肉质茎，见表2、图1。

3 显微鉴别

由于肉苁蓉一般较为粗大，显微镜视野有限，采用显微数码成像技术建立了甘肃栽培肉苁蓉的粉末显微鉴别方法。

3.1 方法 取肉苁蓉样品粉碎过4号筛的粉末，用水合氯醛试液透化后[6]，使用电子成像显微镜，在40倍物镜下观察其显微特征，并拍照见图2。

4 薄层色谱鉴别

4.1 色谱条件的优选

4.1.1 提取方法 对不同的取样量（0.5 g、1.0g、1.5 g），不同的提取方式（水浴回流加热、超声），不同提取溶剂（乙醇、乙醚、甲醇），不同提取时间（10 min、15 min、20 min），分别进行考察，确定了最佳的提取方法。

4.1.2 展开条件 对不同的点样量（0.5 μL、1.0μL、1.5 μL、2.0 μL、2.5 μL），不同薄层板（G板、GF254板、聚酰胺板），不同展开剂[甲醇-醋酸-水（2∶1∶7 ）、甲醇-乙酸乙酯-水（2∶1∶7 ），不同温湿度（T：17 ℃，RH：40%; T：22 ℃，RH：50%; T：25 ℃，RH：60%），不同检视条件（365nm、254 nm）进行了比较，优化了薄层色谱条件（T：温度，RH：干湿球法测定得的相对湿度）。

4.2 对照溶液制备

4.2.1 对照品溶液制备 精密取松果菊苷对照品11.20 mg（按89.7%计）、毛蕊花糖苷对照品12.04 mg（按92.5%計），分别置于10 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，分别制成每1.00mg/mL的松果菊苷对照品溶液，1.11 mg/mL的毛蕊花糖苷溶液，作为对照品溶液。

4.2.2 对照药材溶液的制备 称取肉苁蓉对照药材粉末1.02 g，加甲醇20 mL，超声处理15 min，滤过，滤液浓缩至近干，残渣加甲醇2 mL使溶解，作为样品溶液。

4.3 样品溶液制备 取5批次肉苁蓉粉末各1.0 g，加甲醇20 mL，超声处理15 min，滤过，滤液浓缩至近干，残渣加甲醇2 mL使溶解，作为样品溶液。

4.4 展开 吸取“4.3”的5批次样品溶液、“4.2.1”对照品溶液、“4.2.2”对照药材溶液各2μL点于同一聚酰胺薄层板上，在温度为22～25℃，湿度为40%～50%条件下，以甲醇-醋酸-水（2∶1∶7 ） 为展开剂，展开，取出，晾干。

4.5 检视 将“4.4”项薄层板置于紫外光灯（ 365 nm） 下检视，结果见图3。

5 结果与讨论

5.1 显微鉴别结果 粉末呈棕褐色。薄壁细胞呈不规则多边形，排列紧密，壁略弯曲。厚壁细胞呈类多角形，壁厚，隐约可见层纹。导管为螺纹、网纹导管。淀粉粒较多，为长卵形、球形、长圆形，长 8～40 μm，脐点多呈点状、裂缝状;复粒极少，由2分粒组成[7]。纤维长梭形，有的中间有隔。

5.2 薄层色谱鉴别标准 取本品粉末1 g，加甲醇20 mL，超声处理15 min，滤过，滤液浓缩至近干，残渣加甲醇2 mL使溶解，作为供试品溶液。另取肉苁蓉对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。再取松果菊苷对照品、毛蕊花糖苷对照品，加甲醇分别制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述三种溶液各2 μL，分别点于同一聚酰胺薄层板上，在T：22～25 ℃，RH：40%～50%条件下，以甲醇-醋酸-水（2∶1∶7）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。5批样品试验结果，方法专属性强、斑点清晰、分离效果佳、稳定性好。

6 结论

本文首次建立的甘肃栽培肉苁蓉的显微、薄层色谱鉴别方法，完善了质量控制标准，为甘肃栽培肉苁蓉的鉴别提供了依据，建议可作为荒漠肉苁蓉的品种鉴定依据。

参考文献

[1]国家药典委员会. 中华人民共和国药典（一部） [M]. 北京：中国医药科技出版社，2015：135-136.

[2]玄国东，刘春泉.肉苁蓉苯乙醇苷对D-半乳糖致衰老模型小鼠的抗衰老作用研究[J].中药材，2008，31（9）：1385-1388.

[3]张洪泉，许爱华，李电东.肉苁蓉多糖对肿瘤和荷瘤小鼠的药理作用[J].中国中西医结合杂志，1997，17（S1）：155-156.

[4]龚华梦，胡辉，刘源才.HPLC测定肉苁蓉配方颗粒的含量及指纹图谱研究[J].华西药学杂志，2018，33（6）：623-627.

[5]何燕萍， 尹哲洙， 屠鹏飞， 等.肉苁蓉鉴定与商品药材调查[J].中药材，1997，20（3） ：117-122.

[6]国家药典委员会. 中华人民共和国药典（四部） [M]. 北京：中国医药科技出版社，2015：230-231.

[7]付桂芳，陈敏，崔光红，等.荒漠肉苁蓉和管花肉苁蓉的组织结构比较研究[J].中华中医药杂志，2007，22（12）：840-843.

（收稿日期：2021-03-08 編辑：刘斌）