支原体肉汤培养基的优化及效果评价

张博，马乐，薄晓菲，王雨，孙远，牛明春

（北京生物制品研究所有限责任公司，北京 100176）

支原体是生物制品细胞培养生产工艺中常见的污染物，2015年版《中华人民共和国药典》推荐使用支原体肉汤培养基检测肺炎支原体，精氨酸支原体培养基检测口腔支原体[1]。市场上检测肺炎、口腔支原体也是分别使用这两种培养基。本研究对支原体肉汤培养基在药典配方的基础上进行了配方优化后，可以替代市场上药典配方生产的支原体肉汤和精氨酸支原体肉汤培养基，用于同时检测肺炎、口腔支原体，从而达到用途及培养、检定的统一性，便于生产、研究等工作。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

肺炎支原体（MP），990420，首都儿科研究所；口腔支原体（MO），ATCC23714，购自美国ATCC；精氨酸支原体肉汤培养基、肺炎支原体肉汤培养基，北京三药科技开发公司生产。

pH仪雷磁pHS-3D型，上海三信。

1.2 配制培养基

1号培养基：配方优化后的新鲜支原体肉汤培养基，成分为硫酸镁、氯化镁、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化钠、葡萄糖、L-精氨酸、酚红和精氨酸盐酸盐。2号培养基：配方优化后的干粉支原体肉汤培养基，配方同1号培养基。3号培养基：精氨酸支原体肉汤培养基配方同药典。4号培养基：肺炎支原体肉汤培养基配方同药典。其中，1、2、3号培养基接种口腔支原体，1、2、4号培养基接种肺炎支原体。

1.3 培养基合格性鉴定

4种培养基经高压灭菌后[2]第0 d、7 d、14 d、21 d和28 d，观察外观、检测pH值，每种培养基设4个重复；在20～25 ℃和30～35 ℃两个温度下对4种培养基进行无菌性检查。

1.4 适用性检查

1.4.1 菌种的复苏