甘薯G病毒基因克隆及组培快繁苗病毒检测

蒋素华 白冰洋 牛苏燕 邰作峰 梁芳 袁秀云 崔波

摘要：为了脱除甘薯G病毒，获得优良的脱毒甘薯种苗，提高甘薯的质量和产量，根据NCBI上已报道的甘薯G病毒外壳蛋白基因序列设计引物，用RT-PCR克隆了商薯19叶片G病毒外壳蛋白基因序列。测序结果显示，获得的G病毒外壳蛋白基因为800 bp，与报道的基因序列同源性达99%。经过茎尖脱除病毒和组织快繁技术发现，商薯19芽诱导的最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;苗增殖的最佳培养基为1/2 MS+1.0 mg/L 6-BA+2.0 g/L 椰汁水;根诱导的最适培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA。经过PCR检测，商薯19中确实存在G病毒，经过茎尖脱除病毒后，G病毒的脱毒率达到83%。这为获得甘薯脱毒苗及甘薯病毒检测提供了实践操作的依据。

关键词：甘薯;G病毒;基因克隆;病毒检测;组培快繁苗

中图分类号：S531.01;S531.043 文献标志码： A

文章编号：1002-1302（2021）24-0060-04

收稿日期：2021-04-23

基金项目：河南省高等学校重点科研项目（编号：21B210011、21A210029）;河南省科技攻关计划（编号：202102110167）;河南省科技特派员经费项目。

作者简介：蒋素华（1983—），女，河南漯河人，硕士，副教授，主要从事花卉分子生物学研究。E-mail：jiangsuhua2006@163.com。

通信作者：崔 波，博士，教授，主要从事植物分子生物学研究。 E-mail：laocuibo@163.com。

甘薯种植作为我国覆盖范围较为广泛的农作物生产类型，在我国南北地区均有发展，病毒病在我国各个甘薯种植区快速大范围的蔓延，对甘薯质量和产量造成了巨大的损失[1-4]。在传统种植模式中，由于缺乏对种薯块根内病毒的有效处理技术，导致我国甘薯生产效益不同程度地降低，近几年甘薯脱毒技术虽不断改进和发展，但是真正能用于实际生产并且大面积使用的脱毒技术还未见报道。……