苦参素对缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞线粒体保护作用的研究

杨 超

线粒体是细胞有氧呼吸和能量转化的主要场所，主要由双层生物膜和嵴构成。缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation，H/R)导致线粒体电子传递链受阻，致使活性氧(reactive oxygen species，ROS)大量产生与过剩而引发氧化应激损伤，是各类缺血性心血管疾病共同的病理通路[1,2]。因此，保护线粒体对改善缺血性心血管疾病具有重要意义。苦参素(oxymatrine，OMT)又名氧化苦参碱，是中药苦参的主要活性成分，化学结构属于喹诺西啶类生物碱，具有良好的抗氧化活性[3]。目前临床上主要用于慢性乙型病毒性肝炎及肿瘤放化疗引起的白细胞减少症的治疗，近年来研究发现OMT对缺血性脑损伤后神经元线粒体具有保护作用[4]。本研究将通过建立体外H/R损伤乳鼠心肌细胞模型，探究OMT对H/R所致乳鼠心肌细胞线粒体损伤的保护作用及其可能的机制。

材料与方法

1.实验动物：SPF级SD大鼠乳鼠(<24h)，购自河北省实验动物中心，实验动物许可证号：SCXK(冀)2018-004。

2.药物与试剂：OMT(纯度≥98%)购自南京泽朗医药科技有限公司(批号：20190331)；DMEM培养基、胰酶购自美国Gibco公司；胎牛血清、Annexin V-FITC/PI凋亡试剂盒购自美国Invitrogen 公司；二甲基亚砜(DMSO)购自国药集团化学试剂有限公司；NADH脱氢酶(ND)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素氧化酶(CCO)、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶和ATP检测试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司；膜电位(△ψm)、膜通透性转换孔(MPTP)开放度检测试剂盒购自上海碧云天生物科技有限公司；丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)检测试剂盒购自北京博奥森生物科技有限公司。

3.乳鼠心肌细胞分离与体外培养：参照李雪丽等[5]报道的方法，无菌操作台取乳鼠心脏心室组织，剪碎后加浓……