天麻素对戊四氮致痫模型大鼠的治疗作用及对细胞自噬、凋亡机制的研究

翁柠，况时祥，薛红，何前松，王强，刘建辉，赵芝兰，李艳

癫痫是大脑神经元突发性异常放电，导致大脑功能障碍的一种慢性疾病[1]。癫痫的病因复杂多样，常见的有遗传因素、脑部疾病、全身性或系统性疾病[2-3]。其中先天及围产期因素、遗传代谢性疾病、皮质发育异常所致的畸形等病因多发生于新生儿及婴儿期；而特发性、中枢神经系统感染、脑发育异常等多发生于儿童及青春期；头颅外伤、脑肿瘤、中枢神经系统感染性因素等多发生于成人期；脑血管意外、脑肿瘤、代谢性疾病、变性病等则多发生于老年期[4-5]。根据我国最新流行病学资料显示，国内癫痫病患者日益增加，已经发展成为神经科内仅次于头痛的第二大常见病[6-7]。因此，本研究建立戊四氮致痫大鼠模型，积极探索癫痫的发病机制及癫痫的有效治疗药物，报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料 (1)实验动物： Wistar健康雄性大鼠(购于三峡大学动物实验中心)120只，体质量160～220(180.50±37.52)g，于室温24℃、湿度45%的干净笼子里喂养，饮水和饲料均进行消毒之后自由食用。(2)试剂试药：天麻素(源叶生物公司生产)、戊四氮(PTZ)(Sigma公司生产)、10%水合氯醛(上海雅吉生物科技有限公司生产)，PBS缓冲液(国药集团化学试剂有限公司生产)，蛋白缓冲液(上海谷研实业有限公司生产)，TBST液(国药集团化学试剂有限公司生产)，4%多聚甲醛(临沂盛阳化工有限公司生产)，兔抗小鼠Bax抗体(Selleck公司生产)，大鼠抗兔Beclin1抗体(CiteAbc公司生产)，大鼠抗小鼠Caspase-3(Abcom生产)，兔抗大鼠LC3抗体(Bioworld生产)。(3)仪器设备：光学显微镜(BX53型，OLYMPUS，奥林巴斯株式会社生产)，电泳仪(型号 YQDL001/YQDL002，北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司产品)，成像仪(型号 Lux2 ，普迈精医科技有限公司产品)。……