鼠尾草酸对庆大霉素诱导急性肾损伤的保护作用

曹 静，何 苗，罗 颂，刘 辉(湖南省儿童医院药学部，长沙 410007)

庆大霉素(GM)是临床治疗革兰氏阴性菌的常用药物[1]，在肾脏中呈高浓度分布与代谢，可导致不同程度的肾损伤，约10%～25%的GM使用者会发生肾毒性，部分患者会出现急性肾衰竭(AKI)[2]。GM诱导的AKI机制复杂，氧化应激、炎症反应、细胞凋亡与坏死、自噬等途径均参与了其诱导急性肾损伤的发生过程[3]，其中氧化应激通路的激活在调控炎症和细胞凋亡相关基因的表达中发挥作用[4]。衔接蛋白p66shc是调控氧化应激和生命周期的关键蛋白，主要存在于线粒体膜间隙中[5]。调节p66shc介导的氧化应激反应可能成为治疗GM诱导AKI的关键，对探寻、预防与治疗AKI的药物具有重要意义。

鼠尾草酸(CA)是酚型二萜类化合物，是迷迭香中的主要活性成分，具有抗氧化、抑菌、抗癌、神经保护和抗炎等多种药理活性[6-7]。鼠尾草酸可通过激活核因子E2相关因子2 (Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)以及抑制核因子-κB(NF-κB)通路改善糖尿病肾病的进展[8]，可通过抑制蛋白激酶B/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶亚单位4 (AKT/Nox4)通路减轻单侧输尿管梗阻引起的肾脏纤维化[9]。本文研究了鼠尾草酸对GM诱导的AKI的保护作用，为鼠尾草酸的开发利用奠定基础。

1 仪器与材料

1.1仪器 Western Blot仪(美国Bio-Rad公司)；酶标仪(美国Thermo Scientific公司)；全自动生化仪(武汉精诚伟业医疗设备有限公司)；RM-2135型石蜡切片机(德国Leica公司)；匀浆机(沃信仪器制造有限公司)。

1.2试药 鼠尾草酸(质量分数≥97%)，上海阿拉丁生化科技股份有限公司；p-p66shc抗体，NOVOUS公司；RIPA裂解液，BCA法蛋白定量试剂盒，丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)、超氧化物歧化酶(SOD)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)测定试剂盒，均购自碧云天生物技术公司；……