调节性T细胞在慢性牙周炎小鼠模型中的作用

张文娟，谭昭，蔡如佳，关宁，高秀秋，王琳源

（锦州医科大学 1.附属第二医院牙周黏膜科，辽宁 锦州 121000；2.附属第一医院脑与脊髓损伤重点实验室，辽宁 锦州 121000）

牙周炎是由牙周菌斑微生物引发的牙周支持组织破坏的慢性感染性疾病。虽然菌斑生物膜是牙周炎发生的始动因子，但宿主对牙周病原菌的免疫应答是牙周组织破坏程度的决定性因素［1］。调节性T细胞（regulatory T cell，Treg）是CD4+T细胞的独特亚群，具有免疫抑制活性，通过抑制自身免疫和调节免疫应答防止炎症损伤。研究［2］发现，牙周炎中Treg细胞数量增加，其相关因子白细胞介素-10（interleukin 10，IL-10）、转化生长因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）表达升高，提示Treg细胞参与牙周炎的发病过程。然而，国内关于Treg细胞在慢性牙周炎中具体作用的研究较少。本研究通过抑制小鼠Treg细胞功能，探讨Treg细胞在慢性牙周炎小鼠中的作用。

1 材料与方法

1.1 实验菌株和动物

牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis，P.gingivalis）W83由中国医科大学口腔医学院潘亚萍教授惠赠。SPF级C57BL/6小鼠16只，7 周龄，雌性，购于锦州医科大学实验动物中心。本研究通过锦州医科大学动物伦理委员会审核批准。

1.2 主要仪器与试剂

脑心浸萃液态培养基（中国Solarbio公司）；氯化血红素、羧甲基纤维素（美国Sigma公司）；体内抗小鼠糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体（glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor，GITR）单克隆抗体、同型对照抗体IgG（美国BioXcell公司）；TRIzol、实时PCR试剂盒（中国Vazyme公司）；IL-10、TGF-β1、叉头翼螺旋转录分子（forkhead box P3，Foxp3）引物合成（中国鼎国昌盛公司）；实时PCR仪、高速低温冷冻离心机（美国Thermo公司）；实体显微镜（日本Olympus公司）；FITC标记的CD4、PE标记的Foxp3抗小鼠的单克隆抗体（美国BIOLEGEND公司）；……