葛根护肝胶囊对酒精性肝损伤小鼠保护作用的研究

吉林吉春制药股份有限公司技术研发中心 吉林四平 136504

1 材料与方法

1.1 受试样品

葛根护肝胶囊，由吉林某保健食品公司生产，以葛根450g、黄芪300g、枳椇子200g、五味子150g、蜂胶粉50g、绿茶提取物50g，经提取、混合后，制成1000 粒胶囊，每粒重0.4g。推荐剂量为成人（体重以60kg 计）每次3 粒，每日2 次。

1.2 实验动物和实验环境

SPF 级ICR 种雄性小鼠50 只，体重18g～22g，于屏障动物房内饲养并开展实验，温度22°C～23°C，湿度54%～58%。

1.3 剂量选择与受试物给予方式

按照人体推荐剂量的5、10、30 倍计算，预设置葛根护肝胶囊内容物低中高三个剂量组，分别为0.20、0.40、1.20g/kg.BW，同时设置空白对照组和单纯肝损伤模型对照组，灌胃给药；低中高剂量组的受试物溶液配制方法为：分别取葛根护肝胶囊内容物2.00g、4.00g、12.00g 加1%羧甲基纤维素至200ml。

1.4 主要仪器与试剂

BECKMAN COULTER AU680 全自动生化分析仪、722 可见光分光光度计、加样器、离心机、恒温水浴锅、组织匀浆器、混悬器、载玻片、盖玻片、尼康YS100 显微镜；丙二醛（MDA）测试盒、还原型谷胱甘肽（GSH）测试盒，甘油三酯（TG）测试盒、苏丹Ⅲ染色剂。

1.5 实验方法

受试物低中高剂量组按照上述剂量灌胃受试物，空白对照组、模型对照组给予等体积1%羧甲基纤维素溶液，灌胃体积均为0.2ml/10g·bw，每日1 次，连续30 天。第30 天灌胃结束后，各剂量组和模型对照组灌胃给予50%乙醇（12ml/kg.bw），造成急性酒精性肝损伤模型，空白对照组灌胃给予1%羧甲基纤维素，禁食16 小时后，处死动物，进行相关指标检测及病理组织学检查。

取部分肝脏组织，生理盐水制成10%的肝匀浆，分别检测GSH、MDA 和TG 的含量。

从肝左叶中部选取合适的横切面进行取材，冰冻切片，以苏丹Ⅲ染色。……