Torin2对人甲状腺乳头状癌细胞株生物学行为影响的研究

孙洪莉，魏 枫，梁书卿，王晓艳，郑 朦，李冉浩

甲状腺癌（thyroid cancer，TC）发病率逐年上升，且以女性多见。2018年数据显示，全球TC发病率为6.7／100 000，而我国每年新增病例达 19万（194 232例）。人甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma，PTC）是最常见的类型，约占 TC的90%以上。手术是其主要治疗方法，但仍有30%病人术后出现复发和转移。近年来，随着生物技术的发展和相关研究的不断深入，分子靶向治疗已逐渐成为一个研究热点。雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）是一种蛋白激酶，位于PI3K-Akt-mTOR细胞信号通路的下游，与细胞的转录、翻译、增殖、代谢和转移等行为密切相关。研究表明TC中存在mTOR信号通路的过度活化，而 9-（6-氨基-3-吡啶基）-1-[3-（三氟甲基）苯基]苯并[H]-1，6-萘啶-2（1H）-酮（Torin2）作为一种新的二代mTOR抑制剂，对多种肿瘤细胞的生长和转移均有抑制作用。该研究以人PCT的TPC-1细胞为研究对象，进一步探究Torin2对PTC细胞的增殖、周期、凋亡、迁移的影响以期为今后靶向药物治疗PTC提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

1.2 实验方法

1.2.1 细胞培养 Nthy-ori-3细胞、TPC-1细胞均用含有10% FBS、90%的RPMI 1640培养基，于37℃、5% CO、饱和湿度、无菌孵育箱培养。

1.2.2 MTT比色分析法检测细胞增殖抑制率 实验分组：100、200、400 nmol／L Torin2组、空白对照组。取对数期的2种细胞胰蛋白酶消化、收集、计数，按每孔100μl培养基含2×10个细胞均匀铺96孔板，贴壁后弃上清液加入各浓度Torin2，每组设6个复孔；分别于24、48、72 h在各孔加入20μlMTT溶液（5 g／L），37℃下孵育4 h；弃培养基，向各孔加入150μl二甲基亚砜，在振荡器上低速振荡10 min；……