基因干扰m iR-105抑制非小细胞肺癌细胞的干细胞样特性、恶性增殖和侵袭

李纪远，马 新，张灿斌，王 献，郑帅玉，尚自强

肺癌的发病率是目前所有癌症类型中最高的，其中85%是非小细胞肺癌。超过50%的肺癌患者在确诊1年后死亡。肺癌晚期患者往往由于癌细胞从原发部位转移至远处器官导致预后不良和治疗失败。当前，化学疗法、放射疗法和靶向疗法是比较有效的肺癌治疗方法，但由于化疗药物耐药性，化学疗法的应用受到限制，因此进一步探究预防肺癌发生发展的可能靶点非常必要。

微小RNA是一大类内源性微小非编码RNA，长度为21～22个核苷酸，可调节约30%的人类基因表达。越来越多的证据表明，微小RNA可以作为癌基因和抑癌基因参与肿瘤的发展。microRNA-105（miR-105）与肝癌、结肠癌和卵巢癌的发生发展有着密切关系。已有研究表明 miR-105通过上调Mcl-1促进非小肺癌细胞的上皮-间质转化。能靶向负调控KIFC1抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力。但miR-105对非小细胞肺癌的具体作用机制仍不清楚。该文旨在探究基因干扰miR-105对非小细胞肺癌细胞的干细胞样特性、恶性增殖和侵袭的影响，为靶向治疗非小细胞肺癌提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验试剂

Dulbecco's modified Eagle's medium（DMEM）培养基（货号：12100-046）、青链霉素（货号：15140-122）、胎牛血清（货号：26400-036）、胰蛋白酶（货号：15050-057）和F12培养基（货号：21700-075）购自美国Gibco公司；LipoRNAi转染试剂（货号：C0535）、BCA蛋白浓度测定试剂盒（货号：P0012）购自上海碧云天生物技术研究所；Transwell（货号：3374）购自美国 Corning公司；Anti SOX2（货号；ab97959）、OCT4（货号：ab18976）、VEGF（货号；ab2350）、β-actin（货号：ab8227）购自英国 Abcam公司。

1.2 细胞培养

33例肺癌及癌旁组织来源于河南科技大学第一附属医院，所有涉及研究的标本取材均预先征得患者及家属知情同意，并经过医院伦理委员会批准，RT-PCR检测肺癌组织和癌旁组织中miR-105表达水平。……