淡色库蚊羧酸酯酶基因高表达与溴氰菊酯抗药性相关性研究*

吕 园 邱 樊 张红波 徐敬薇 沈 波**

(1.南京市第一医院，南京医科大学附属南京医院核医学科，江苏南京 210006；2.南京医科大学病原生物学系，江苏南京 210000)

蚊是重要的医学昆虫，能传播多种疾病，如疟疾、登革热、西尼罗河热、丝虫病、黄热病、寨卡病毒病等，严重危害人类健康。化学防制由于方便、高效和经济等特点，一直是蚊媒综合治理策略中的重要方法(陆宝麟, 2002)。拟除虫菊酯类杀虫剂具有广谱、高效、低毒和低残留的特点，是目前蚊媒防制现场应用最多的合成杀虫剂(Sahuetal., 2020)。然而，杀虫剂长期、大量的使用导致了抗药性的发生和发展。据报告，自 1947 年首例蚊抗药性报道以来，至今已有超过 125 种(亚种)蚊虫对一种或多种杀虫剂产生了抗性(CfD, 2010)。抗药性已经成为蚊媒和蚊媒病防制工作中的最大障碍(Inghametal., 2020)。

抗药性是多个基因、多重机制参与的生物进化现象，没有某一个基因或一类机制能够完整阐明抗药性(Ffrench-Constantetal., 2004)。全面系统地寻找蚊抗药性基因和调控因子、探寻其参与抗药性机制，一直是蚊媒防制研究中亟待解决的问题(Itokawaetal., 2019)。本课题组在前期工作中，利用高通量转录组测序，从我国分布广、种群密度高的重要家栖性淡色库蚊Culexpipienspallens中鉴定出一些溴氰菊酯抗药性相关基因，其中包括羧酸酯酶(CPIJ002786-RA，carboxylesterase)。根据高通量测序结果，其表达水平在实验室抗性选育品系较敏感品系高表达2.71倍(P<0.05)，FDR(False Discovery Rate，假阳性率)<0.001。因此，我们预测淡色库蚊羧酸酯酶基因(CPIJ002786-RA)可能与溴氰菊酯抗药性相关，值得我们进一步探索。本研究采用荧光定量PCR方法检测羧酸酯酶基因(CPIJ002786-RA)在实验室抗性选育品系和敏感品系，及山东商河、山东孤岛、山东惠民、江苏江心洲现场抗性株和敏感株的表达水平，旨在探索羧酸酯酶基因(CPIJ002786-RA)作为蚊抗药性现场检测靶标的潜在应用价值。

1 材料与方法

1.1 供试蚊采集与饲养

淡色库蚊实验室敏感品系为采集于山东省济宁市唐口地区(35.12 N；116.50 E)的自然种群，长期饲养于本实验室，未接触任何杀虫剂。……