腺苷三磷酸对人外周血单个核细胞hBD-2表达的影响及其分子机制探讨

张梦洁

上海中医药大学附属普陀医院，上海200062

人β防御素2（hBD-2）是第一个被发现的具有 可诱导表达特性的防御素［1］，广泛分布于皮肤、支气管肺部、子宫等部位，尤其以支气管肺部表达最多。其具有良好的杀菌能力和抗病毒、抗真菌、抗肿瘤等多种生物学活性，能趋化多数免疫细胞，在固有免疫和特异性免疫中均有重要功能，因此在肺部炎症性疾病中发挥重要作用。在自然条件下，hBD-2表达水平极低或不表达；在受到外界因素刺激诱导后，则在各种组织黏膜细胞中表达并上调，发挥其抗微生物和调节免疫的功能［2］。腺苷三磷酸（ATP）是一种辅酶，通过多种蛋白功能为机体多种合成反应提供所需能量，增强机体组织及细胞的代谢活性，因而其对治疗各种疾病均有较强的针对性。目前，ATP已被广泛应用于细菌、病毒、球虫等引起的呼吸、消化及生殖系统疾病的临床辅助治疗。实验研究发现，ATP可以上调大鼠防御素2（mBD-2）的表达，但ATP是否可以上调hBD-2的表达水平目前鲜有文献报告。2016年9月—2017年7月，我们应用ATP体外刺激人外周血单个核细胞（PBMCs），观察其是否可诱导hBD-2表达，并探讨其可能的分子机制。

1 材料与方法

1.1 主要实验试剂 PBMCs分离液（Ficoll）及ATP干粉均购自美国Sigma公司，胎牛血清购自美国BI公司，青霉素链霉素溶液（双抗）、RPMI-1640培养液、HBSS和PBS缓冲液均购自美国HyClone公司，台盼兰购自美国Gibco公司，人白细胞介素1β（IL-1β）和hBD-2酶联免疫吸附（ELISA）测定试剂盒均购自武汉Elabscience公司。

1.2 实验方法

1.2.1 标本来源与收集 经医院伦理委员会批准，收集健康志愿者20名，男10例、女10例，年龄（35.2±10.5）岁，汉族，均已签署知情同意书。……