侧柏叶对家兔心肌缺血-再灌注损伤的保护效应及其胆碱能抗炎作用*

李 丽 高 波 刘梅芳

(济宁医学院药学院，日照 276826)

冠心病严重威胁人类健康，心肌缺血-再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)是冠心病治疗过程中面临的一大挑战，而寻求抵抗MIRI的药物具有重要的临床应用价值。目前认为，MIRI的损伤机制与自由基损伤、钙超载和炎性损伤等有关[1]。

我们的前期研究表明，侧柏叶(Cacumen Biotae,CB)乙酸乙酯提取物具有抗氧化应激、抗炎[2]等功效，因此我们推测CB乙酸乙酯提取物对MIRI有治疗作用。本文以心率、收缩压、血清肌酸激酶(creatine kinase，CK)、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase，LDH)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-a)、白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、乙酰胆碱(acetyl choline,ACH)以及心肌组织总一氧化氮合成酶(nitric oxide synthetase,NOS)为检测指标，探讨CB对家兔MIRI的保护效应及其相关机制。

1 材料与方法

1.1 动物

健康成年家兔32只，体重2～2.5kg，雌雄不限，由山东大学实验动物中心提供。

1.2 主要试剂

侧柏叶取自济宁医学院本草园，去枝干，留针尖叶。石油醚分析纯(批号：20130419)购自烟台三和化学试剂有限公司；乙酸乙酯(批号：20151214)购自上海山蒲化工有限公司；LDH(批号：20170516)试剂盒、CK(批号：20170511)试剂盒、IL-6(批号：20170518)试剂盒、TNF-α(批号：20170518)试剂盒、ACH(批号：20170517)试剂盒以及NOS(批号：20170511)试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

1.3 侧柏叶乙酸乙酯萃取物制备

新鲜侧柏叶200g，清洗阴干后，用粉碎机磨成粗粉，并以1∶10的比例连续3次加水煎煮，每次1.5h，合并煎液并用抽滤装置过滤，并将滤液于60℃以下用旋转蒸发仪浓缩，然后用分液漏斗按照1∶1的比例，先用石油醚萃取分层后取水层，再用同等比例的乙酸乙酯萃取，最后用旋转蒸发仪浓缩为浸膏，得侧柏叶乙酸乙酯萃取物，并置于4℃冰箱备用，用蒸馏水将侧柏叶乙酸乙酯萃取物稀释为1×103g/L的混悬液灌胃。……