福建医科大学附属泉州第一医院胸外科,福建 泉州 362000
食管癌是上消化道常见的癌症之一,也是全球癌症相关死亡率的第6大主要原因。食管癌患者的常规临床治疗包括手术、放疗和化疗[1]。尽管近年来改良了治疗技术,但食管癌患者的总体5年生存率仍仅为20%~30%[2]。因此,了解食管癌发病的分子机制,对于发现更多的肿瘤特异性生物标志物和治疗靶点,进行早期诊断和治疗具有重要意义。miRNA是一类高度保守的、非编码的18~25个核苷酸的RNA,在转录后水平上起负调控基因表达的作用[3]。miRNA依赖于其靶基因,通过影响肿瘤细胞的增殖、迁移、凋亡、分化和代谢,既可以作为癌基因,也可以作为抑癌基因。miR-122在胃癌、卵巢癌等肿瘤中发挥抑癌作用,抑制肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭等[4-5];而在肾癌、三阴性乳腺癌等多种肿瘤中发挥致癌作用,促进肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭等[6-7];但是miR-122-5p对食管癌细胞的作用尚不清楚。已有研究[8]表明,cAMP反应元件结合蛋白1(cAMP response element-binding protein 1,CREB1)在食管鳞状细胞癌组织中过表达,与患者的淋巴结转移和肿瘤淋巴结转移阶段呈正相关。本文主要研究miR-122-5p通过靶向CREB1对食管癌细胞及移植瘤的生长的作用及机制。
1.1.1 主要试剂及仪器
RPMI-1640培养基购自上海慧颖生物科技有限公司(货号:C21700500BT),miR-NC、pc-NC、miR122-5p mimic、pc-CREB1质粒和实验所用各种引物由生工生物工程(上海)股份有限公司设计并合成,MTT试剂盒购自上海歌凡生物科技有限公司(货号:GM01-500T),胎牛血清、青霉素和链霉素双抗溶液购自上海素尔生……