濒危植物瑶山苣苔的大小孢子发生和雌雄配子体发育研究

施慧嫒 陈发菊 梁宏伟 王玉兵

（三峡区域植物遗传与种质创新重点实验室/三峡大学生物技术研究中心，宜昌 443002）

瑶山苣苔（Dayaoshania cotinifolia）为苦苣苔科（Gesneriaceae）瑶山苣苔属（Dayaoshania）多年生草本植物，仅分布于广西大瑶山局部地区［1］，因其仅有一个分布点，个体数量稀少，分布面积狭窄，且受人类活动的影响而处于濒危状态。在1999 年国务院颁布的《国家重点保护植物名录》（第一批）中被列为国家Ⅰ级保护植物；在2012 年原国家林业局颁布的《全国极小种群野生植物拯救保护实施方案（2010～2015）》中，瑶山苣苔被列为优先拯救保护的极小种群植物；在2013 年原环境保护部和中国科学院发布的《中国生物多样性红色名录——高等植物卷》中被评估为极危种（CR）（http：//www.mee.gov.cn/gkml/hbb/bgg/201309/t20130912_260061.htm）。目前，瑶山苣苔的生物学研究主要集中于开花生物学［2］、形态解剖学［3］、种群生态学［4～6］、组织培养［7～8］和保护遗传学［9］等方面，而与瑶山苣苔生殖生物学相关研究未见报导。本文利用常规石蜡切片法对瑶山苣苔的大小孢子和雌雄配子体发育进行研究，探讨其在该发育过程中是否存在致濒环节，其结果也可为瑶山苣苔及苦苣苔科植物的生殖生物学研究积累基础资料。

1 材料和方法

瑶山苣苔实验材料于2009 年5 月至2010 年7月采自广西壮族自治区金秀老山自然保护区。将不同发育时期的瑶山苣苔花芽和受精后的雌蕊材料于FAA 固定液（70%Ethyl alcohol 90ml：Acetic acid 5mL：Formalin 5mL）中固定24 h 后，带回实验室，分离出雌蕊和雄蕊并分别放入装有70%酒精溶液的小瓶中，置于4℃冰箱备用。采用常规石蜡切片法［10］，Laica RM切片机连续切片，切片厚度8 μm；……