联氨氧化酶初步纯化及醌类化合物对其活性影响
2021-03-22 02:41:38李竺芯，张寿通，李阳，阎松
大连理工大学学报
2021年2期
李 竺 芯， 张 寿 通， 李 阳， 阎 松
(大连交通大学 环境与化学工程学院，辽宁 大连 116021)
0 引 言
目前已知的厌氧氨氧化菌主要包括5个属，即CandidatusBrocadia、CandidatusKuenenia、CandidatusScalindua、CandidatusJettenia和CandidatusAnammoxoglobus[6，8]，均属于浮霉菌门(Planctomycetes).厌氧氨氧化反应过程中发挥核心作用的是厌氧氨氧化菌，由于这种菌生长世代长，致使其难以培养，目前仅能获得其富集培养物，人们对这种菌适宜分离与生长生态条件的研究还很有限[9-10].2007年，Shimamura等从富集有菌株KSU-1的生物反应器中分离纯化出一种具有联氨(N2H4)氧化活性但不具备NH2OH氧化能力的酶，将其正式命名为联氨氧化酶(hydrazine oxidizing enzyme，HZO)[11-14].联氨氧化酶是厌氧氨氧化菌的特征代谢酶，它可为厌氧氨氧化菌的多样性研究提供依据[15-16].厌氧氨氧化菌的代谢途径并没有准确的定论，这主要是由于对厌氧氨氧化菌的关键代谢酶缺乏深入研究，缺乏对联氨氧化酶纯化的研究，对联氨氧化酶相关性质的研究也很欠缺.若能根据提取纯化的厌氧氨氧化菌关键代谢酶来分析其活性和具体功能，将有助于对其代谢模式的确定[17].
本文对厌氧氨氧化菌进行实验室扩大培养，制备厌氧氨氧化菌的无细胞抽提液，采用超滤、DEAE阴离子层析等方法纯化厌氧氨氧化菌的特征代谢酶联氨氧化酶，检测酶活性.并研究适宜温度、pH下厌氧氨氧化菌联氨氧化酶的性质及外源醌类化合物是否会对厌氧氨氧化反应进行催化，参与到厌氧氨氧化过程.这对确保工艺的长期高效稳定运行具有重要意义.
