新西兰兔RBM4基因的克隆、序列分析及组织表达

魏后军 胡波 陈萌萌 范志宇 宋艳华 仇汝龙 朱伟峰 王芳

摘要：为分析RBM4基因在新西兰兔不同组织的表达差异情况，本研究根据GenBank中公布的穴兔RBM4基因序列设计了特异性引物，从兔肾脏中扩增出RBM4基因并进行了生物信息学分析，同时采用实时荧光定量PCR技术研究了RBM4基因在新西兰兔各组织中的表达差异。结果表明，扩增出的新西兰兔RBM4基因长度为1 080 bp，编码359个氨基酸。序列比对结果显示，新西兰兔与穴兔、牛、鼠、人、鲑鱼等动物RBM4基因的核苷酸一致性为44.1%～99.8%。进化树分析结果表明，新西兰兔RBM4基因与其他哺乳动物RBM4基因亲缘关系较近。实时荧光定量PCR结果显示，RBM4基因在新西兰兔的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和脑中均有表达，其中在肾脏中表达量最高，在脑中表达量最低。本研究成功克隆了新西兰兔RBM4基因，并研究了其mRNA在兔各组织中的表达情况，为研究兔RBM4基因的表达及其生物学功能奠定了基础。

关键词：RBM4基因;克隆;序列分析;表达;新西兰兔

中图分类号： S852.2文献标志码： A文章编号：1002-1302（2021）02-0033-04

收稿日期：2020-11-09

基金项目：现代农业产业技术体系建设专项（编号：CARS-43-C-1）。

作者简介：魏后军（1986—），男，江苏南京人，硕士，助理研究员，主要从事家兔疾病防治与兽医生物技术研究。E-mail：whj280941235@126.com。

通信作者：王芳，博士，研究员，主要从事家兔重要疫病致病机制及防控技术研究。E-mail：rwangfang@126.com。

RNA结合基序蛋白4（RNA binding motif protein4，RBM4）是一种多功能RNA结合蛋白，参与多种转录后调控过程，包括前体mRNA（pre-mRNA）的选择性剪接、翻译控制等[1]。人RBM4含有364个氨基酸，分子大小约40 ku，N端含有2个RNA识别基序（RNA recognition motifs，RRMs）和1个CCHC型锌指结构，RRMs是结合RNA的主要位点;C端有3个富含丙氨酸的延伸，具有RBM4的细胞定位及与其他蛋白质互作的作用[2]。……