长链非编码RNA MIR4435-2HG靶向微小RNA-1-3p调控信号通路磷脂酰肌醇激酶/蛋白激酶B对胰腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的机制研究

胰腺癌是一种恶性程度高的恶性肿瘤，胰腺癌早期即可发生局部浸润及转移。目前手术、放疗等手段对胰腺癌的治疗效果较差且病人生存预后差。因而从胰腺癌的发生机制方面探究有效治疗胰腺癌的方法具有十分重要的意义。既往研究发现长链非编码RNA（Long non-coding RNA，LncRNA）可参与基因转录激活、调节蛋白功能及转录后调控等多种生物学过程，并可调控恶性肿瘤转移及侵袭。研究表明长链非编码RNA MIR4435-2HG（Long non-coding RNA MIR4435-2HG，LncRNA MIR4435-2HG）在肝细胞癌中的表达明显增高，并可通过调控微小RNA-487a（microRNA-487a，miR-487a）表达进而促进肝细胞癌细胞增殖。但MIR4435-2HG在胰腺癌中的表达及其对胰腺癌发生发展过程的影响尚未可知。相关报道指出微小RNA-1（microRNA-1，miR-1）在胰腺癌内皮细胞中呈低表达，上调miR-1表达可以抑制胰腺癌内皮细胞迁移及血管生成。通过starBase在线网站预测到微小RNA-1-3p（microRNA-1-3p，miR-1-3p）可能是MIR4435-2HG的靶基因，然而MIR4435-2HG是否可通过调控miR-1-3p表达进而参与胰腺癌的发生发展过程尚未可知。已有报道指出磷脂酰肌醇激酶（phosphoinositide 3-kinase，PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B，Akt）信号通路失活可明显抑制胰腺癌细胞增殖、迁移及侵袭。然而，MIR4435-2HG是否可调控PI3K/Akt信号通路进而影响胰腺癌细胞增殖、迁移及侵袭仍未可知。目前国内外对MIR4435-2HG在胰腺癌发生发展中的作用机制研究相对较少，本研究于2017年1月至2018年12月通过抑制胰腺癌细胞中MIR4435-2HG表达，以研究其对胰腺癌细胞的生物学行为及PI3K/Akt信号通路的影响，并首次探讨胰腺癌细胞中MIR4435-2HG与miR-1-3p的靶向调控关系及其内在作用机制，以期为揭示胰腺癌发病机制奠定理论基础。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂