乳腺癌是女性常见的一种恶性肿瘤,约有24%~60%的乳腺癌病人因为肿瘤转移而死亡。肝细胞生长因子(Hepatocyte growth factor,HGF)也被称为扩散因子,是具有促有丝分裂的一种独特的生长因子。HCF由间充质细胞所分泌,其受体酪氨酸蛋白激酶MET(c-met)蛋白作为一种阔膜蛋白,存在于多种上皮细胞膜上。当HCF与c-met蛋白发生特异性结合,导致c-met蛋白酪氨酸激酶活性的激活,从而使该通路上多种底物蛋白发生磷酸化,从而调控细胞的增殖和分化。本研究探讨分析HGF/c-met信号通路与乳腺癌侵袭转移的相关性,为了阐明乳腺癌发生发展提供依据,现报告如下。
1.1 一般资料
选择2018年3月至2019年3月承德医学院附属医院临床术后经病理证实的乳腺癌标本75例、乳腺纤维腺瘤标本60例以及癌旁正常乳腺组织标本50例。乳腺癌病理类型均为浸润性导管癌,正常乳腺组织取自乳腺癌根治术后标本距离肿瘤(或肿瘤结节)边缘大于5 cm的区域。75例乳腺癌病人均为女性,年龄(51.93±7.32)岁,范围为33~76岁,其中左乳腺39例、右乳腺36例,肿瘤直径≥2 cm病人33例、<2 cm病人42例;TNM分期Ⅰ期21例、Ⅱ期25例、Ⅲ期19例、Ⅳ期10例;其中伴有淋巴结转移病人35例、无淋巴结转移病人40例。1.2 方法
1.2.1
SP免疫组化法 石蜡包埋连续切片4µm,3%过氧化氢孵育10 min封闭灭活内源性过氧化物酶;磷酸缓冲盐溶液(PBS)冲洗5 min后将切片放入0.01 mL/L枸橼酸缓冲液中微波抗原修复10 min;加入山羊血清封闭60 min(37℃),滴加适当浓度的一抗,37℃孵育60 min后4℃过夜,PBS洗5 min×3;滴加羊抗兔/鼠IgG二抗,室温孵育15 min,PBS洗5 min×3;3,3"-二氨基联苯胺四盐酸盐(DAB)显色,苏木素复染核,封片、观察。……