邱 洁,孙 虎,谢 爽,张彩彩,陈 磊
(海南医学院第二附属医院 麻醉科,海南 海口,570311)
丙泊酚是常用麻醉药之一,但会引起一些不良反应[1]。麻醉剂与患者手术后认知障碍(POCD)密切相关。研究[2-3]表明,丙泊酚可通过磷酸化海马区Tau蛋白诱导POCD的发生。目前,丙泊酚导致认知功能障碍的机制尚不清楚,有学者[4]认为海马神经元γ-氨基丁酸A(GABA)受体与认知功能关系密切。本研究观察丙泊酚麻醉对老龄大鼠认知功能和海马GABA受体的影响,现报告如下。
选取50只清洁级Wista大鼠,鼠龄20~22月龄,体质量360~420 g,雌雄不限,由长沙市天勤生物技术有限公司生产提供,许可证号为SCXK(湘)2014-0011,使用许可证号为SYXK(湘)2014-006。动物处理及实验过程得到海南医学院动物关怀及使用委员会的许可(IACUC0023)。实验研究过程中严格遵守3R原则。
呼吸麻醉机(武汉医用仪表有限公司),呼吸监护仪(Datex Engstorm仪器公司,芬兰)。商用体温传感器(Philips公司,德国),啮齿动物脉搏血氧计和心率监测仪(Datex Engstorm仪器公司,芬兰)。
RPMI-1640培养液、胰蛋白酶(Gibco公司,美国),兔抗鼠GABA单克隆抗体、辣根过氧化物酶(HRP)标记的第二抗体(Sigma公司,美国);丙泊酚(批号090822,河北九派制药有限公司);酶标仪SpectraMax M5P[上海美谷分子仪器(上海)有限公司],倒置相差显微镜(上海苍茂实业有限公司),低温高速离心机(长沙湘智离心机仪器有限公司),SDS-PAGE凝胶电泳及转移装置(上海优宁维生物科技股份有限公司),LAS400凝胶成像系统(GE公司,美国)。
1.3.1 动物分组及处理:所有实验动物在动物房进行适应性饲养1周。……