低聚壳聚糖对小鼠的辐射损伤防护作用探讨

郭剑平,张华屏,周朝东,杨仲田

(1.中国辐射防护研究院GLP中心，太原，030006；2.山西医科大学，太原,030001；3.中国辐射防护研究院, 太原，030006)

壳聚糖是自然界广泛存在的甲壳素经脱乙酰化得到的产物，是天然多糖中唯一的碱性多糖。小于20个单糖的壳聚糖称为低聚壳聚糖。有研究表明低聚壳聚糖具有抗辐射损伤作用[1-2]，并且毒性极低。本文从组织、细胞、蛋白和基因表达水平探讨低聚壳聚糖的辐射损伤防护效果及机理，为筛选高效、低毒的辐射防护药物提供参考依据。

1 实验材料

1.1 低聚壳聚糖

以食品级大分子壳聚糖为原料，敏化剂协同作用，经辐照降解氧化后制备而成。分子量<2 kD，分散系数1.21。使用前用蒸馏水配制成溶液。

1.2 实验动物

6周雄性清洁级SX1近交系小鼠，山西省肿瘤研究所动物实验室提供，许可证号：SCXK(晋)2007-001。

1.3 辐照源

60Co γ源，活度1.2×1015Bq，中国辐射防护研究院钴源房。

1.4 主要仪器和试剂

1.4.1仪器

BD FACSAria型流式细胞仪，贝克曼公司；转印槽/伯乐转膜仪，BIO-RAD，Trana-Blot；化学发光检测系统试剂，BIO-RAD；化学发光荧光成像系统，Chemi Doc XRS。

1.4.2试剂

凋亡试剂盒(Annexin V-FITC)，凯基公司，国产；beta-actin抗体，sc-47778，Santa Cruz Biotechnology；P53抗体:sc-73566，Santa Cruz Biotechnology。

2 实验内容和方法

2.1 小鼠30天存活率

实验小鼠按给药浓度随机分5组，每组10只，口服灌胃，给药剂量为0(单纯照射组)、200、300、400和500 mg/kg，每天给药1次，连续14天，给药第7天对小鼠进行全身照射，吸收剂量7 Gy，剂量率70 cGy/min。观察不同处理组30天小鼠存活情况，统计30天存活率、平均存活天数，计算保护指数[3]。

保护指数≥1.2为有保护作用。

2.2 骨髓有核细胞数

实验小鼠随机分为正常对照组、单纯照射组、低聚壳聚糖组(300 mg/kg)，每组10只。连续灌服低聚壳聚糖21天，每天1次。……