不同标本前处理方法对新型冠状病毒核酸检测结果的影响*

张相猛，徐秋芳，施怡茹，卢晓芸，赵锦江，徐瑞芳

上海市青浦区疾病预防控制中心微生物检验科，上海 201700

由新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染所致的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)在全球大范围的暴发、流行[1]。人感染SARS-CoV-2后常出现乏力和呼吸道症状，如发热、咳嗽、气促和呼吸困难等[2]。SARS-CoV-2传染力强，易造成聚集性感染，其常规检测方法为实时荧光定量PCR[3]，主要针对SARS-CoV-2基因组中开放读码框1ab(ORF1ab)和核衣壳蛋白(N)基因进行检测[4]。SARS-CoV-2属于β属冠状病毒，对紫外线和热敏感，现在普遍认为56 ℃ 30 min、乙醚、75%乙醇等均可有效灭活SARS-CoV-2[5-6]。根据《新型冠状病毒肺炎实验室检测技术指南》[7]，感染性材料或活病毒应在采用可靠的方法灭活后在生物安全二级实验室进行核酸检测，但是指南对具体灭活方法并没有进行明确规定。目前，SARS-CoV-2核酸检测假阴性率过高，灭活对病毒检出率的影响不容忽视。

1 材料与方法

1.1标本来源 选取本院SARS-CoV-2核酸检测结果为阳性的18份未灭活咽拭子标本为研究对象。

1.2仪器与试剂 数显电热恒温水浴锅(上海浦东荣丰科学仪器有限公司)、干浴锅(上海蓝豹实验仪器有限公司)、全自动核酸提取仪(江苏硕世科技股份有限公司)、LightCycle 480Ⅱ实时荧光定量PCR仪(瑞士罗氏公司)。SARS-CoV-2核酸检测试剂盒(双重荧光PCR法，上海之江生物科技股份有限公司，批号：20200303)。

1.3方法

1.3.1标本处理 将所有标本均匀分成7份，每份体积为250 μL；分别采用56 ℃金属浴30 min、56 ℃金属浴60 min、56 ℃水浴30 min、56 ℃水浴60 min、化学裂解15 min、化学裂解30 min 6种方法进行标本前处理；每份标本均设置对照(不做任何处理)。

1.3.2核酸检测 采用全自动核酸提取仪进行核酸提取。……