非人哺乳动物细胞系身份鉴定的研究进展

朱亮,屠珏,王德军

(浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学研究所,杭州 310053)

实验细胞系为研究者提供了取之不尽、经济实惠的医学生物学研究材料。利用细胞系模拟人体生物学机制,检测治疗效果以及合成治疗用蛋白已成为常用的研究手段。在动物细胞使用过程中,细胞系误用、细胞系间交叉污染和长期传代导致细胞遗传变异这三个问题长期困扰着学术界和产业界[1-5]。

针对人源细胞,研究者开发了多种细胞来源鉴定方法,主要有染色体核型分析、同工酶分析、多位点DNA指纹分析、短串联重复序列(short tandem repeats,STR)标记检测、单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)分析、RNA序列分析,乃至全基因组测序分析。从检测准确度、技术普及度、人力物力和时间成本各方面综合考虑,目前STR标记检测法是最佳选择。2011年美国国家标准学会(ANSI)和美国典型培养物保藏中心(ATCC)发布了人源细胞系STR标记检测标准,对人源细胞系鉴定的必要性和操作方法进行了详尽的说明[6],确立了STR标记检测法在细胞系身份鉴定中的核心地位。美国典型培养物保藏中心(ATCC)、德国微生物与细胞保藏中心(DSMZ)、日本研究生物资源细胞库(JCRB)和日本理化研究所生物资源中心(RIKEN)等权威细胞库都对保藏的人源细胞系进行了STR标记检测,并建立了人源细胞系STR标记数据库。

与人源细胞相比,非人源细胞污染现象同样严峻,但受到的关注比较少,鉴定技术发展较慢。德国最权威的细胞库DSMA对其保藏非人源细胞系检测结果显示,细胞交叉污染率为6%,而人源细胞交叉污染率为10%[7]。……