288例确诊及疑似骨髓增生异常综合征患者基因突变分析

傅煜，张赫楠，姜若腾，符爽，张继红

（中国医科大学附属盛京医院血液研究室，沈阳 110022）

骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndrome，MDS）是一组异质性很强的造血干细胞克隆性疾病，并具有高风险向白血病转化的特点，临床诊断和治疗均极为复杂。另外，由于早期MDS细胞形态改变不明显，临床表现隐匿，给这一部分患者的确诊及治疗带来难度。早期MDS诊断主要通过骨髓形态及染色体核型检测，随着二代测序技术的应用，基因突变谱系在MDS中的分布开始为临床诊疗提供依据。世界卫生组织2016版MDS修订分型亦将SF3B1基因突变纳入MDS伴环形铁粒幼红细胞增多（MDSring sideroblasts，MDS-RS）的诊断依据［1］。随着研究的不断深入，会有更多的分子标记出现。本研究通过探索确诊MDS各类型以及确诊与疑似MDS间基因突变差异，为MDS的诊断及分型提供分子依据。

1 材料与方法

1.1 临床资料

选取2015年8月至2019年12月就诊于我院的201例确诊MDS患者及87例疑似MDS患者骨髓标本。所有入组确诊及疑似MDS患者均符合2019年版中国MDS诊断和治疗指南［2］的相应标准。MDS确诊患者的分型参照2016年WHO分型标准，包括MDS伴原始细胞增多（MDS-excess blasts，MDS-EB）、MDS伴单系病态（MDS-single lineage dysplasia，MDS-SLD）、MDS伴多系病态（MDS-multilineage dysplasia，MDSMLD）、MDS-RS以及MDS未分型（MDS-unclassifiable，MDS-U）。患者一般临床资料见表1。

1.2 骨髓单个核细胞处理及样本检测

表1 患者一般临床资料Tab.1 Characteristics of patients

将抗凝骨髓离心取单个核细胞于细胞裂解液（天根生化科技北京有限公司）中，混匀后静置裂解10 min，并离心留取单个核细胞沉淀。应用过柱法（天根生化科技北京有限公司）提取DNA以备下一步测序。

1.3 二代测序检测基因突变

应用MDS基因突变二代测序检测试剂（上海源奇生物医药科技有限公司），测序深度3 000源。……