亚硒酸钠促进多形汉逊酵母DL-1合成谷胱甘肽的转录组学分析

王 婷，刘婵婵，任 娟，荆蓉蓉，钱卫东,*

（1.陕西科技大学食品与生物工程学院，陕西 西安 710021；2.西安医学高等专科学校，陕西 西安 710032）

谷胱甘肽（glutathione，GSH）又称γ-谷氨酰半胱氨酰甘氨酸，是一种由L-谷氨酸、L-半胱氨酸及L-甘氨酸组成的活性三肽。其结构中还原态的巯基能结合重金属离子和氧自由基，具有缓解重金属中毒、抗氧化功能，可以促进糖类、脂肪及蛋白质代谢，并具有防止溶血、防止皮肤色素沉积、有效防止食品的酶促或非酶促的褐变、增强食品风味和营养等作用。目前，GSH的制备方法主要包括化学合成法、酶转化法及发酵法[1]。其中，利用酿酒酵母[2]（Saccharomyces cerevisiae）、毕赤酵母[3]（Pichia pastoris）、产朊假丝酵母[4]（Candida utilis）为工程菌发酵生产GSH的方法，具有菌种易培养、产量高、纯度好、品质安全，生产工艺完善等优点，被广泛应用于医药、化妆品和食品等行业中GSH原料的生产。

多形汉逊酵母（Hansenula polymorpha）是美国食品药品监督管理局批准的食品级酵母，属于甲醇型酵母，具有营养要求简单、耐酸（pH值适应范围为2.5～8.0）、耐高温（温度适应范围为25～48 ℃）、繁殖快、发酵密度高、便于遗传操作的优点，是乙型肝炎病毒表面抗原、人干扰素、胰岛素等生物工程产品开发和拓展的主要细胞平台之一[5]。Wang Dahui[6]和Xu Ruoyang[7]等通过紫外线-γ射线复合诱变、优化培养基补料方式、构建基因重组菌株、低pH值胁迫[4]促进产朊假丝酵母中GSH合成积累。钱卫东等[8]以30 μg/mL Na2SeO3诱导多形汉逊酵母使酵母胞内GSH产量提高到215.21 mg/L，但对于Na2SeO3诱导下多形汉逊酵母生物合成和积累GSH的分子机制仍有待进一步阐明。

近年来，转录组测序（RNA-Seq）技术因其分辨率高、数据重现性好等优势，逐渐成为研究基因表达水平、新基因的检测挖掘及其功能注释的重要手段[9]。……