644例肺癌中HER-2 20外显子插入突变阳性率及临床病理分析

葛晓松，王晓莉，刘晓媛，刘 芬，高 翔，常树建

多项研究已经证实HER-2基因变异是肺癌的驱动基因之一，且部分靶向药物治疗有效[1-3]。其基因变异方式主要有两种：HER-2编码基因扩增或蛋白过表达、HER-2编码基因激活突变。其中，20外显子插入突变是肺癌中HER-2基因最常见的突变形式[4]。有文献回顾性分析了肺癌中HER-2 20外显子插入突变的阳性率及与临床病理特征的相关性[5-10]，而较少有文献报道肺癌中HER-2 20外显子插入与EGFR、ALK、MET、ROS1、BRAF、KRAS、NRAS、PIK3CA等9个驱动基因突变位点以及与PD-L1表达的相关性。本文采用荧光定量PCR法同时分析644例肺癌标本中9个驱动基因的突变情况，探寻HER-2 20外显子插入突变肺癌患者的临床特征，旨在为肺癌临床精准诊疗提供参考。

1 材料与方法

1.1 临床资料选取2018年5月～2019年11月江南大学附属医院存档的手术切除、气管镜活检、胸水富集脱落细胞等标本合计644例。其中男性366例，女性278例，中位年龄65岁。病理类型：鳞状细胞癌60例，腺癌552例，无法区分鳞状细胞癌和腺癌1例，其他类型31例(包括腺鳞癌、小细胞癌、大细胞癌、肉瘤样癌、黏液表皮样癌、神经内分泌癌)。TNM分期：Ⅰ期267例，Ⅱ期42例，Ⅲ期88例，Ⅳ期248例，本实验经江南大学附属医院伦理委员会批准。

1.2 肺癌标本中DNA及RNA的提取、纯化、保存及基因突变PCR检测提取方法严格按照试剂盒说明书操作，在确保无交叉污染的前提下，石蜡包埋组织连续4 μm厚切片10～20张，利用石蜡组织DNA/RNA共提取试剂盒(厦门艾德生物医药公司)提取基因组DNA及总RNA，操作步骤严格按试剂盒说明书进行。所提取DNA于-20 ℃冰箱保存，总RNA于-70 ℃冰箱保存备用。……