间接免疫荧光法检测血小板相关抗体新判读标准的建立和评价

杨细媚，万祥辉，黄超，付晶晶，刘志强，柯江维

（1.江西省儿童医院检验科，2.肿瘤医院检验科，江西 南昌 330006）

血小板具有复杂的抗原系统,包括与其它组织或细胞所共有的抗原,如ABO血型系统抗原和人类白细胞抗原(human leukocyte antigen，HLA)；血小板特异性抗原(human platelet antigen，HPA)等[1]，而输血，感染等因素可诱导机体产生血小板抗体，导致相应疾病的产生[2-3]。目前研究较多的血小板自身抗体有两类：一类是针对HLA类抗原的抗体，即血小板表面相关抗体 (platelet associated immunoglobulin,PAIg)；一类是针对血小板糖蛋白的血小板特异性抗体[4-5]。本研究采用修正判读标准后的间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence assay,IIF)检测PAIg。现对新标准进行评估，确定其可靠性，了解其在免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia,ITP)和红斑狼疮(lupus erythematosus,SLE)相关临床疾病中的诊断意义，及与流式细胞仪法(flow cytometry method,FCM)的符合率。

1 材料与方法

1.1 一般资料 收集2020年全年江西省儿童医院确诊的ITP患儿261例，男154例，女107例，平均年龄3.51岁；SLE患儿50例，男8例，女52例，平均年龄12.69岁，为实验组。AA患儿50例为病例对照组，男19例，女31例，平均年龄5.38岁。正常体检儿童50例为正常对照组，男30例，女性20例，平均年龄3.50岁。

1.2 仪器与试剂 莱卡荧光显微镜。 BD FACSCantoⅡ流式细胞仪。血小板抗体间接免疫荧光法检测试剂盒购于欧蒙诊断试剂有限公司。CD61，FITC-IgG购于BD公司。

1.3 检测方法 IIF法检测PAIg，以修正前后的新旧标准进行两次判读，对两次结果进行统计学分析。然后用FCM检测PAIg，对两组方法检测的一致性进行分析。

1.3.1 IIF法检测PAIg按试剂说明书的检测方法进行操作。结果判读：将原来的判读标准“与阳性对照结果一致判断为阳性”修正为“血小板着染均一荧光，以荧光强度大于或等于阳性对照稀释3倍后的荧光强度判断为阳性”。……