裴 婷,张海利,陈 英,史 聪,樊慧娟
微小RNA(miRNA)是一类约20~24 nt所构成的内源性非编码单链小分子RNA,主要通过与互补靶系列结合干扰翻译发挥作用,改变蛋白的表达,影响细胞的生物功能。miR-30a-5p是其中的一员,据报道,调节miR-30a-5p可以影响多种恶性肿瘤细胞的进展,但是在喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma, LSCC)中未见报道。转移相关基因1(metastasis associated gene 1,MTA1)主要通过脱去相应抑癌基因组蛋白的乙酰基而重塑染色质的结构,使其结构紧密不易转录,减弱表达,增强癌细胞的转移。多数文献报道MTA1的过表达与人类恶性肿瘤的恶性程度及进展密切相关。前期研究表明过表达的MTA1可以促进LSCC细胞的增殖、迁移和侵袭,但是其发生机制尚未阐明。该研究通过生物信息技术以及相应的细胞功能实验观察细胞增殖、迁移、周期和凋亡的情况,表明 miR-30a-5p/ MTA1轴可能对LSCC的发生机制产生一定的作用,为今后的诊断、治疗和愈后提供新思路。
1.1 材料
该实验所采用的LSCC细胞是Hep2细胞由耳鼻咽喉头颈外科山西省重点实验室提供。DMEM培养基、10%胎牛血清(FBS)、TRIzol试剂、opti-MEM购自美国赛默飞世尔科技公司;胰酶-EDTA溶液、PBS、细胞周期试剂盒和细胞凋亡试剂盒购自上海西格玛奥德利齐贸易有限责任公司;青链霉素购自上海英潍捷基贸易有限公司;谷氨酰胺购自北京沃卡威生物技术有限公司;CCK-8购自北京全式金生物技术有限公司;4%多聚甲醛购自武汉博士德生物工程有限公司;结晶紫购自北京索莱宝科技有限公司;Dual-Luciferase报告基因检测系统试剂购自美国……