大鼠股动脉血管原代内皮细胞的分离与培养

刘 倩，韩陈陈，罗婷婷，张 雨，李 浩，马 旸，魏 伟

根据血管的结构、功能和运输方向差异，分为动脉、静脉和毛细血管。血管壁作为血液与组织的边界，由内膜、中膜和外膜构成。内皮细胞主要存在于内膜层，在生理条件下释放一氧化氮(NO)、前列环素2(PGI2)和内皮素(ET)，有助于松弛血管张力并调节血管对血浆成分和血小板的渗透性。中膜层由平滑肌细胞组成，可支持内皮细胞并诱导血小板黏附和聚集。外膜层由结缔组织组成，是血管与组织之间的边界。

目前已有人、鼠、兔、犬等大血管内皮细胞的分离培养方法，但关于大鼠较小血管如股动脉原代内皮细胞分离、培养方法及功能研究鲜有报道。大鼠股动脉位于腹股沟耻骨联合处，管径窄小，分离其原代内皮细胞有一定难度。所以，探索一种简便可行的提取、分离、培养方法十分必要。该研究综合股动脉生理特性与血管内皮细胞生长需求，制备出一种有效、简便的内皮细胞分离与培养方法，并对其进行了鉴定和功能研究。

1 材料与方法

1.1 实验动物

选取7～8周龄SPF级雄性Wistar大鼠，并饲喂于安徽医科大学SPF级实验动物中心。温度：20～26 ℃；日温差：≤4 ℃；相对湿度：40%～70%。实验动物购自北京维通利华实验动物技术有限公司，生产许可证号：SCXK(北京)2016-0006。该实验在处理动物过程中遵循安徽医科大学实验动物伦理章程。

1.2 试剂

DMEM /F12 基础培养基、完全培养基、胎牛血清及PBS均购自以色列Biological Industries公司；胰酶(含EDTA)、青霉素-链霉素抗菌溶液、DAPI 染色液及防荧光淬灭封片液均购自上海碧云天生物技术研究所；……