大黄素上调微小RNA-206减轻缺氧诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞损伤

吴坤，张建刚，孙科，朱金钊

作者单位：安阳市人民医院神经内科，河南 安阳455000

缺氧（hypoxia）可导致机体器官功能障碍，诱导很多病理过程的发生，如氧化应激、炎症等。缺氧性脑病是一个严重的临床问题，造成许多病人的运动障碍、认知功能障碍和死亡。从干燥根茎和虎杖根中提取的大黄素（Emodin）具有抗氧化作用和抗肿瘤作用。越来越多的证据表明，大黄素具有神经保护作用，可以减少活性氧、白细胞介素-8（IL-8）和单核细胞趋化蛋白1的产生来防止动脉粥样硬化斑块的形成。但是，大黄素在神经损伤中的保护作用的机制尚未十分清楚。微小RNA（miRNA）指一组长度为21～25 nt 的非编码RNA，它通过调节特定基因参与多种生物学过程，包括细胞增殖、分化和代谢。研究表明，miRNA在多种类型的疾病中异常表达，包括心脏病、炎性疾病和癌症。微小RNA-206（miR-206）在神经损伤病人中的表达水平出现异常，其是否参与大黄素的作用机制尚未清晰。于2018年6月至2019年6月，以大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞为对象，进行本研究，旨在探索大黄保护缺氧诱导神经损伤的功能机制与miR-206的关系。

1 材料与方法

1.1 材料

PC12细胞购自上海中科院细胞库；大黄素购自Sigma 公司；二甲基亚砜（DMSO）购自上海钰博生物科技有限公司；兔抗人裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Cleaved-caspase-3）单克隆抗体购自碧云天；辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔二抗购自Abbkine；聚偏二氟乙烯（PVDF）膜（0.45μm）购自Millipore公司；膜联蛋白/异硫氰酸荧光素-碘化丙啶（Annexin V-FITC/PI）凋亡检测试剂盒购自Solarbio；丙二醛（MDA）检测试剂盒、超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒购自南京建成生物工程研究所；……