miR-495-3p联合黄氏总皂苷对高糖诱导的成骨细胞增殖、凋亡的影响及其机制研究

刘亚东，卢小伟

作者单位：湖北医药学院附属东风医院骨外科，湖北 十堰442000

骨质疏松症是中老年人最常见的骨科疾病，随着中国社会老龄化，骨质疏松症发病率逐步上升，而骨折是最常见也是最严重的并发症。糖尿病性骨质疏松症（Diabetic osteoporosis，DOP）是糖尿病的并发症之一，以糖尿病为特征，伴随着骨量减少、骨组织微结构改变、骨强度降低和骨脆性增加。DOP是一种继发性骨质疏松症，2型糖尿病被认为骨质疏松症相关骨折的危险因素。目前，DOP的发病机制尚不清楚。既往研究表明，高糖环境下，成骨细胞的增殖受抑制，凋亡率明显升高。黄芪总皂苷（Total saponins of Astragalus membranaceus，TSA）是黄芪主要的活性成分之一，现阶段已分离得到包括黄芪皂苷Ⅰ-Ⅷ在内的40多种三萜皂苷类成分。资料显示，TSA可促进小肠上皮细胞、神经干细胞NSCs的增殖。由黄芪等药材制成的黄芪散可以促进高糖作用下的成骨细胞增殖。黄芪注射剂可以明显提高22例DOP病人的骨密度，取得较好疗效。然而，TSA 作用于DOP的研究鲜见报道。微小RNA（microRNA，miRNA）是一类高度保守的非编码RNA。报道指出，微小RNA-495-3p（miR-495-3p）通过调节胃癌发生过程中的多种表观遗传修饰因子起到肿瘤抑制剂的作用，脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）处理显著下调人牙周膜细胞这miR-495-3p 表达，但miR-495-3p对成骨细胞的作用尚不明确。因此，2018年2月至2019年4月，本研究利用高糖诱导商购小鼠的细胞MC3T3-E1构建DOP模型，观察黄芪总皂苷对高糖培养的MC3T3-E1细胞增殖、凋亡的影响，并结合miR-495-3p探寻其作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验主要试剂