NgR基因沉默神经干细胞和雪旺细胞-PLGA移植于创伤性脑损伤大鼠皮层对神经功能恢复的作用*

李丹霞，童康强，张晓璐，周佳林，韩建国，韩彦军，邵 国，张春阳

[1.内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院，内蒙古 包头 014010；2.包头医学院神经外科疾病研究所(转化医学)；3.内蒙古自治区骨组织再生与损伤修复工程技术中心]

创伤性脑损伤(Traumatic brain injury，TBI)一直是各年龄段发病率、致残率和死亡率的主要原因之一，虽然最初的脑损伤涉及急性和不可逆的原发性脑实质损伤，但随后的继发性脑损伤通常会在数月至数年内缓慢进展，因此为治疗干预提供了一个窗口[1]。目前已经证实干细胞移植能够促进脑损伤的功能恢复，而聚乳酸-聚乙醇酸(PLGA)有承载细胞的能力[2]。研究神经修复机制中发现NgR(Nogo receptor)信号传导通路是其中一条重要的机制[3]，通过抑制NgR的表达，使轴突生长抑制受限，促进受损的神经结构和功能恢复。根据这些发现，我们运用组织工程学方法，将NgR基因沉默的神经干细胞(neural stem cells, NSC)和雪旺细胞(Schwann cells,SC)-PLGA复合体移植至创伤性脑损伤大鼠皮层损伤区，观察移植复合体在大鼠皮层损伤区通过改变局部微环境促进神经元的存活、轴突再生及功能恢复情况。

1 材料与方法

1.1材料 健康成年雌性Lewis大鼠48只，体重约250g。PLGA(广州创赛生物医用材料有限公司)，DEME培养基、胎牛血清(广州济恒医药科技有限公司)，兔抗鼠NgR基因抗体、山羊抗兔抗体(武汉博士德公司)；慢病毒载体构建(汉恒生物科技有限公司)；HE染色试剂盒(北京索莱宝科技有限公司)；NeroTMTransfection系统(赛默飞世尔生命科技有限公司)；电子颅脑损伤仪(e CCI Model-6.3，Custom Design & Fabrication，Inc，美国)；显微器械(上海金钟)。……