外源添加山梨醇和海藻糖对意大利蜜蜂抗寒性能的影响

赵丽娜 张卫星 秦 明 王 颖 王红芳 刘振国 胥保华

(山东农业大学动物科技学院，泰安271018)

1 材料与方法

1.1 试验设计

本试验于2019年3月底至2019年10月底在山东农业大学试验蜂场和山东农业大学本部2号楼进行。从意蜂姊妹蜂群中随机选取900只刚出房的幼蜂，随机分成6组，每组3个重复，每个重复50只蜜蜂。6组均于实验室内饲养，于常温(30 ℃)和冷处理(4 ℃冷驯化2 h)条件下，分别饲喂蔗糖溶液(对照，由蔗糖和去离子水配制成的蔗糖水平为50%的糖溶液)、海藻糖溶液(由蔗糖、去离子水和海藻糖配制成的海藻糖水平为5%的糖溶液)及山梨醇溶液(由蔗糖、去离子水和山梨醇配制成的山梨醇水平为10%的糖溶液)。

各组蜜蜂饲养于饲喂盒中(每盒50只蜜蜂)，并将饲喂盒放置于恒温恒湿培养箱中，调节恒温恒湿培养箱的温度为30 ℃，相对湿度为50%～60%，各组分别饲喂12 d，冷处理条件下的3个组在饲喂12 d后放置于4 ℃低温培养箱中冷驯化2 h。蜜蜂冷冻于-80 ℃冰箱中储存。另取900只意蜂，按照以上分组饲养，用于取血淋巴。蜜蜂抗寒性能指标包括游离水、结合水、脂肪、糖原和蛋白质含量，THL、SDH活性以及血淋巴中山梨醇、海藻糖、果糖含量。并采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测蜂体海藻糖-6-磷酸合成酶(TPS)、SDH的mRNA相对表达量差异。

1.2 蜂体过冷却点、冰点测定

过冷却点、冰点的测定参考秦玉川等[18]的热电偶方法，使用低温恒温槽和数据采集器等组成的过冷却点测定系统，将温度探头置于蜜蜂腹部，并进行固定。温度探头与计算机系统相连置于低温恒温槽中，蜂体温度随着恒温箱温度以2 ℃/min持续下降，直至蜂体开始结冰，蜂体在小分子抗冻保护剂的作用下释放潜热，体温开始回升，体内刚开始回升时的温度为过冷却点。……