澳洲坚果MiSTPP6基因克隆及低温胁迫下表达分析

蔡元保 杨祥燕 李季东 黄思婕 李穆 巫辅民

蔡元保（1981-），高級农艺师，主要从事果树分子生物学与遗传育种研究工作，主持国家自然科学基金项目、广西重点研发计划项目和广西自然科学基金等科研项目4项，并作为主要成员参与农业农村部行业科技专项、广西创新驱动发展专项等重大科研项目。以第一完成人或主要完成人获得省部级科技奖2项，地厅级科技奖4项;以第一发明人或第一完成人获得国家专利授权18项（其中发明专利6项）和计算机软件著作权登记6项。主持或主要参与广西地方标准2项，作物新品种登记5个;以第一作者或通讯作者在《南方农业学报》《植物学报》《植物生理学报》《植物遗传资源学报》等期刊上发表论文30多篇，并获得优秀论文13篇。

摘要：【目的】克隆澳洲坚果丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶（PP1）家族基因（MiSTPP6），并分析其不同组织及低温胁迫下的表达模式，为澳洲坚果PP1家族基因的抗寒分子机制提供理论依据。【方法】基于澳洲坚果转录组测序结果，利用RT-PCR技术克隆MiSTPP6基因，对其序列进行生物信息学分析，并利用实时荧光定量PCR检测其在不同组织及低温胁迫下的表达情况。【结果】从澳洲坚果中克隆获得MiSTPP6基因（GenBank登录号为MT374553），其cDNA全长2129 bp，最大的阅读框（ORF）长度为948 bp，编码315个氨基酸残基，含有PP1蛋白家族的典型结构域（MPP_PP1_PPKL）和特征性序列（LRGNHE）。MiSTPP6蛋白为稳定的亲水性蛋白，以丝氨酸磷酸化为主，可能定位于细胞质，属于非分泌型蛋白或膜蛋白，与已知植物PP1蛋白的氨基酸序列具有很高的相似性。……