上调VEGF-B基因对慢性心力衰竭大鼠的作用及机制

陈磊 吴小燕 (海南医学院第二附属医院心内科，海南 海口 570100)

慢性心力衰竭属于心功能逐渐减退的病理过程，当心力衰竭出现后，心脏会在疾病的作用下导致引起心肌重构，进而导致心功能出现进行性的下降〔1〕。有研究表明〔2〕，慢性心力衰竭的基本病理机制为心肌重构，当心脏结构发生改变后，心肌舒张功能出现障碍，心排血量明显不足，不能满足机体所需要的代谢需求，其临床表现为日常活动受限，伴随着不同程度的呼吸困难，属于多种心血管疾病的终末阶段。血管内皮生长因子(VEGF)-B属于VEGF家族中的成员，具有促血管生成、保护神经、供给机体营养的作用，并参与脂质代谢等生物学过程〔3〕。VEGF-B作为一种促进血管生成因子，具有促进心肌血管新生和促进心肌血管内皮的增殖的作用〔4〕。有研究表明〔5〕，低水平的VEGF-B和心脏疾病中发生心室重构、左心室功能有关。本研究观察上调VEGF-B基因对慢性心力衰竭大鼠作用及机制。

1 材料与方法

1.1材料 研究动物：选取SPF级SD健康大鼠40只，由济南朋悦实验动物繁育有限公司提供，鼠龄(3.9±0.6)个月，体重(225.8±11.5)g。所有大鼠养殖在干净笼子里，室温(22.1±1.8)℃，相对湿度35%～40%，每天光照12 h，喂饮纯净水，饲养时间1 w。本研究所做实验均获得医院伦理委员会批准。

主要试剂：Lipofectmine 2000转染试剂盒(购于北京义翘神州科技有限公司)，RPMI 1640培养基(购于武汉纯度生物科技有限公司)，Ca试剂盒、CaN试剂盒(购于南京建成生物工程研究所)，小鼠抗大鼠NFAT3抗体、兔抗大鼠p-NFAT3抗体(购于Santa cruz公司)。

1.2方法

1.2.1基因转染 取小鼠心肌细胞放置于RPMI 1640培养基中(含10%胎牛血清)、恒温为37℃、含有体积分数为5%的CO2的培养箱中进行培养，当培养瓶中细胞融合率达到80%～90%时使用0.25%的胰酶消化，传代。……