多花黄精多糖PcUER1基因的克隆与表达分析

程 鹤，祝明珠，徐 君，刘峻麟，2，俞年军，2，彭代银，周 安，吴振东，韩荣春

(1.安徽中医药大学药学院，安徽 合肥 230012；2.安徽省中医药科学院中药资源保护与开发研究所，安徽 合肥 230012；3.安徽省青阳县九华中药材科技有限公司，安徽 池州 242800)

黄精为2020年版《中华人民共和国药典》收载的常用中药材，其正名始见于《名医别录》，具有补气养阴、健脾、润肺、益肾等功效。其化学成分主要为多糖、甾体皂苷类，多花黄精多糖由多种单糖包括葡萄糖、甘露糖、岩藻糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖和鼠李糖等构成。黄精多糖具有抗肿瘤、抗病毒、抗炎、降血糖、调血脂、提高免疫功能和记忆力等作用。

鼠李糖是一种单糖，其在植物体中主要的功能是参与植物多糖合成，也常作为细菌荚膜和细胞壁的组成成分，鼠李糖在植物和细菌界中的应用很广泛。3,5-异构酶/4-还原酶(3,5-epimerase/4-reductase,UER1)是UDP-葡萄糖向UDP-鼠李糖转化的关键酶之一，这种酶有还原酶和异构酶的酶活结构域。庞朝友在棉花纤维素中发现该酶的基因，其为核苷糖并主要参与多糖的合成。拟蓝芥细胞壁中存在该酶的基因，并参与鼠李糖的合成。UER1参与多糖的合成，并且是多糖合成中必不可少的酶基因。因此，本研究对多花黄精多糖中UER1基因进行克隆，并进行生物信息学分析，为其多糖的生物合成提供理论参考，并为多花黄精中次生代谢产物的研究提供实验基础；同时，构建多花黄精PcUER1基因的质粒的体外载体，为后续的蛋白组学研究提供实验依据。

本课题组前期研究显示，UER1是多花黄精多糖中第6种单糖UDP-鼠李糖的关键酶基因，而UDP-鼠李糖是由UDP-葡萄糖脱水酶(RHM)及UER1催化合成。……