QuEChERS-气相色谱-质谱法测定番茄中胺鲜酯的残留含量

白雪梅 杨金川

摘要 [目的]建立一种适用气相色谱-质谱 （GC-MS）测定番茄中胺鲜酯（DA-6）的方法。[方法]样品经过乙腈提取、PSA净化，浓缩，采用GC-SIM-MS检测，基质外标法定量。[结果]胺鲜酯进样质量浓度在10～500 μg/L与峰面积间线性关系良好，决定系数 （R2）为0.999 4，定量限 （LOQ）为0.010 mg/kg;在添加水平分别为0.01、0.05、0.20 mg/kg时，该方法的平均回收率在83.9%～102.0%，相对标准偏差 （RSD）在3.4%～9.3%。[结论]该方法简便、快速，具有良好的灵敏度、重复性，可适用于番茄中胺鲜酯含量的测定。

关键词 胺鲜酯;气相色谱-质谱法;残留含量;番茄

中图分类号 TS 207.3文献标识码 A

文章编号 0517-6611（2021）05-0200-02

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2021.05.056

开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

Determination of Diethyl Aminoethyl Hexanoate Residues in Tomatos by QuEChERS-Gas Chromatography-Mass Spectrometry

BAI Xue-mei1，YANG Jin-chuan2

（1.Guizhou Adverting Monitoring Center，Guiyang，Guizhou 550001;2.Institution of Supervision and Inspection Product Quality of Guizhou Province，Guiyang，Guizhou 550016）

Abstract [Objective]A residue analytical method was developed for diethyl aminoethyl hexanoate （DA-6） in tomato with gas chromatography-mass spectrometry （GC-MS）.[Method]The samples were extracted with acetonitrile，purified by PSA，concentrated，detected by GC-SIM-MS，and quantified by the matrix external standard method.[Result]The injection mass concentration of diethyl aminoethyl hexanoate had a good linear relationship with the peak area between 10-500 μg/L，the coefficient of determination （R2） was 0.9994，and the limit of quantification （LOQ） was 0.010 mg/kg.The average recoveries at three spiking levels （0.01，0.05，0.20 mg/kg） in tomatos were 83.9%- 102.0%，and the relative standard deviations （RSD） were 3.4%-9.3%.[Conclusion]The method is simple，fast，has good sensitivity and repeatability，and can be applied to the determination of diethyl aminoethyl hexanoate in tomato.

Key words Diethyl aminoethyl hexanoate （DA-6）;Gas chromatography-mass spectrometry （GC-MS）;Residues;Tomato

胺鲜酯（己酸二乙氨基乙醇酯，DA-6），分子式为C 12H 25NO 2，相对分子质量为215.33。胺鲜酯是20世纪90年代美国科学家首先发现的一种新型广谱高效植物生长调节剂，有促进农作物生长、显著提高作物产量等优点，同时又有高效、低毒、低残留、环境相容性好等特点，现广泛应用于玉米、白菜、葡萄、番茄等作物的生长调节上。目前，关于胺鲜酯在农产品上的检测研究已有很多报道，主要有气相色谱法[1]、气相色谱-质谱法（GC-MS）[2-4]、超高效液相色谱-质谱/质谱法（UPLC-MS/MS）[5-7]等。

关于胺鲜酯在番茄上的应用已有研究，如刘忠德[8]研究2%胺鲜酯水剂在番茄上的应用;刘海涛[9]研究了3%胺鲜酯·复硝酚钠水劑对温室大棚番茄产量及品质的影响;徐加利等[10]研究了复硝酚钠和胺鲜酯·复硝酚钠对大棚番茄生长和果实品质的影响。这些研究说明胺鲜酯已经被研究施用于番茄的生长生产调节上。但关于胺鲜酯在番茄上的检测研究却鲜见报道。该研究以番茄中的胺鲜酯为研究对象，建立了一套快速、准确、灵敏的GC-MS残留分析方法，可用于测定番茄中胺鲜酯的残留量，也可为该药在其他果蔬中残留检测提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂 气相色谱-质谱联用仪 （Agilent GC7890A/MS5975C，美国安捷伦公司）;振荡混匀器 （MultiReax，Heieloph公司）;冷冻离心机 （Allegra X-22R ，美国贝克曼库尔特公司）;数显混匀仪 （IKA MS3，KA公司）;自动氮吹仪 （TufboVap LV，Biotage公司）。乙腈 （分析纯）;乙酸乙酯 （色谱纯）;氯化钠 （分析纯）;胺鲜酯标准品0.1 g （≥97.3%，Dr.Ehrenstorfer公司）。

1.2 样品处理方法

1.2.1 样品的制备。

取番茄样品1 kg （个体较小的取全果处理;个体加大的以对称轴切块后处理），将其样品切碎后混匀，通过四分法或将全部样品转入到组织捣碎机中捣碎成匀浆，放入聚乙烯瓶中，于-18 ℃保存备用。

1.2.2 样品的前处理。

1.2.2.1 提取。匀浆的样品称取10 g （精确至0.01 g）于50 mL离心管中，加入乙腈10 mL振荡提取30 min，再加入4～5 g NaCl振荡提取5 min，然后以6 000 r/min离心5 min，待取上清液，净化。

1.2.2.2 净化。取6 mL上述上清液于15 mL聚丙烯QuEChERS净化管（1 200 mg MgSO 4+400 mg PSA）中，涡旋振荡1 min，8 000 r/min离心5 min，然后取2 mL离心上清液于玻璃试管中，45 ℃水浴中，氮吹吹至近干，用1 mL乙酸乙酯定容后，涡旋混合复溶，过0.22 μm滤膜到进样小瓶中，待GC-MS检测。

1.3 色譜条件

1.3.1 气相色谱条件。色谱柱为石英毛细管柱HP-5 MS（30 m×0.25 mm ×0.25 μm）;载气为He，纯度≥99.999%;气体流速为1.00 mL/min;尾吹气 （He）为60 mL/min;进样方式为不分流进样;进样体积1 μL。程序升温：初温40 ℃，保持1 min，然后以30 ℃/min升至130 ℃，再以5 ℃/min升至160 ℃，最后以20 ℃/min升至300 ℃，保持5 min;共22 min。进样口温度250 ℃。

1.3.2 质谱条件。

离子源温度230 ℃;四极杆温度150 ℃;接口温度240 ℃;电子轰击 （EI） 离子源;电子能量70 eV;采集模式：选择离子扫描 （SIM）模式，选择离子为m/z 86、100、143，其中m/z 86为定量离子;溶剂延迟5 min。

上述条件下，胺鲜酯的保留时间为8.51 min。

1.4 标准曲线的绘制

准确称取胺鲜酯标准品0.01 g（精确到0.000 1 g）于100 mL容量瓶中，用乙酸乙酯定容至100 mL，得100 mg/L胺鲜酯标准母液，然后再用乙酸乙酯稀释至10、20、50、100、500 ng/L的系列标准工作溶液，在“1.3”条件下进行测定。以目标物定量离子的峰面积（y）为纵坐标、进样质量浓度（x）为横坐标，绘制标准曲线，进行线性回归分析。

1.5 添加回收试验

取一定量的空白对照样品，加入一定量的胺鲜酯标准溶液，按照“1.2.2”进行提取、净化，以“1.3”色谱条件检测，测定回收率及相对标准偏差（RSD）。胺鲜酯在番茄中的添加水平分别为0.01、0.05、0.20 mg/kg，每个添加浓度5次重复。

2 结果与分析

2.1 色谱条件的选择

在实际的检测中，既要保证待测物的完全分离，同时又要保证所有组分流出色谱柱，且分析时间越短越好，所以对于复杂的样品，通常采用程序升温方式。该研究参考文献选用HP-5 MS色谱柱对胺鲜酯进行检测摸索，并对升温程序的升温速率及分离效果进行反复试验，优化后的程序升温速率见“1.3.1”。在此仪器条件下，胺鲜酯和杂质有很好的分离效果，色谱见图1。

2.2 提取净化条件的选择

胺鲜酯在有机溶剂中有良好的溶解性，而乙腈可以和水混合互溶形成很好的共萃物，可以充分地提取目标物，然后在通过加氯化钠（或饱和氯化钠溶液），使乙腈和盐水分层，分离出有机层，因此该试验采用乙腈作为提取溶剂;而对净化条件的选择，该研究主要是参考文献，使用QuEChERS （1 200 mg MgSO 4+400 mg PSA，赛分公司）净化管按“1.2.2”方法净化。

通过净化和非净化样品对比，发现PSA能够有效去除有机酸、部分色素等杂质，以及可以有效去除干扰峰，而对胺鲜酯没有什么影响，所以该试验采用乙腈作为提取溶剂，用PSA （QuEChERS净化管）净化。

2.3 方法的标准曲线、检出限和定量限

基质效应是指基质成分和目标化合物在进行离子化时相互竞争而导致目标化合物信号强度有不同程度的增强或减弱的现象，其包括基质增强效应和基质抑制效应。基质效应=B/A×100%，式中，A 为在纯溶剂中农药的响应值;B 为样品基质中添加的相同含量农药的响应值。

以浓度500 ng/mL为例，在番茄基质样品中的基质效应为215%，说明存在着明显的基质增强效应。由于胺鲜酯在GC-MS上存在基质增强效应，为了减小基质效应的影响，该研究采用基质标曲定量。以番茄作为基质，再将其稀释成质量浓度为10、20、50、100、500 μg/L的一系列基质标准工作溶液，在上述“1.3”色谱条件下进行测定。以目标物定量离子的峰面积 （y）为纵坐标、进样质量浓度 （x）为横坐标，进行线性回归分析，结果表明，胺鲜酯进样质量浓度在10～500 μg/L与峰面积呈良好的线性关系，决定系数R2为0.999 4。以3倍信噪比（S/N）时所对应的浓度为分析方法的检出限（LOD），以最小添加浓度作为方法的定量限（LOQ），该方法的LOD和LOQ分别为0.005、0.010 mg/kg。

2.4 方法的精密度与回收率

当样品中的添加水平分别为0.01、0.05、0.20 mg/kg时，胺鲜酯在番茄样品中的平均添加回收率在83.9%～102.0%，相对标准偏差 （RSD）在3.4%～9.3% （表1），结果表明该方法具有良好的精密度、准确度和重现性。

2.5 番茄样品的检测

30份市售番茄样品，通过“1.2”前处理，以“1.3”质谱条件检测，结果显示，有2份样品检测出阳性，检出率为6.7%，其中最高的检出值为0.04 mg/kg;其余样品均未检出。

3 讨论与结论

谢柳青等[1]介绍的GC-FID测定胺鲜酯在小白菜中的残留方法，该方法前处理操作繁琐，基质干扰强，且氢火焰离子化检测器（FID）容易出现假阳性;梁林等[2-4]报道的方法中采取传统提取过程，该方法操作烦琐复杂且耗时，消耗大量有机溶剂。该研究建立了GC-MS法快速测定番茄中胺鲜酯含量的分析方法，该方法用乙腈提取，QuEChERS净化浓缩，GC-MS检测，

该方法前处理简单快速、易于操作、重现性好、灵敏度和准确度高、线性范围宽且线性关系良好，解决了传统方法操作烦琐复杂耗时且消耗大量有机溶剂的缺点，更适用于番茄中胺鲜酯的快速定性和定量检测，也可为胺鲜酯在其他果蔬中的检测提供参考。

参考文献

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