DAPT预处理对脑缺血/再灌注损伤小鼠的神经保护作用

陈华轩，罗 波，王 林，张 渊，刘 毅，范润金

(四川省南充市中心医院/川北医学院第二临床医学院神经外科，四川南充 637000)

脑卒中是导致死亡的主要原因之一，其中缺血性脑卒中约占80%[1]，它因发病率和致残率“双高”的特点而备受重视。缺血性脑卒中急性期患者主要通过组织纤溶酶原激活物静脉溶栓治疗，但血管再通可导致神经细胞延迟死亡，从而引起脑缺血/再灌注损伤[2]。既往研究证实细胞凋亡、炎性反应、氧化应激、血脑屏障破坏等是缺血性脑卒中导致脑损伤的主要发病机制[3]，进一步研究发现Notch信号通路是一种调控脑缺血/再灌注损伤的重要途径[4]，但现阶段仍未明确脑缺血/再灌注损伤被Notch信号通路调控的具体机制。N-[N-(3，5-双氟酚内氨酰)]-S-苯氨基乙酸t-丁基酯{N-[N-(3，5-difluorohenacetyl-L-alanyl)]-S-phenyl glycine t-butyl ester，DAPT}作为常见的γ-分泌酶抑制剂，其通过阻断酶切过程来抑制Notch信号通路的信号传导，有助于减轻脑缺血/再灌注损伤。本研究通过DAPT预处理及建立局灶性小鼠脑缺血/再灌注模型，观察动物模型神经功能缺损、神经细胞凋亡、脑梗死体积、炎症指标、星形胶质细胞活化指标、Notch信号通路激活指标的变化，旨在探讨DAPT预处理对脑缺血/再灌注损伤小鼠的神经保护作用及其机制。

1 材料与方法

1.1 动物及实验材料

SPF级8周龄雄性C57BL/6小鼠75只，体质量(28±2)g，购自上海杰思捷实验动物有限公司，生产许可证号：SCXK(沪)2018-0004；TUNEL试剂盒(瑞士Roche公司)；2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium,chloride,TTC)染液购于北京雷根生物技术有限公司；Hes1和Hes5 抗体购于美国Abcam公司；DAPT和Notch1抗体购于美国CST公司；……