饮水中添加硼对肉鸡免疫功能的影响

张 潇，位 兰，李新正，李国建，肖曙光，邢启银，杨建平

(1.河南牧业经济学院 动物科技学院，河南 郑州 450046； 2.河南科技大学 动物科技学院，河南 洛阳 471000)

硼(B)是微量元素之一，资源丰富，广泛分布于自然界中。硼是动物机体可能的必需微量元素之一，通过影响多种酶的活性及能量底物的利用，进而调节机体多种生理功能[1]。硼对动物机体矿物质代谢、蛋白质代谢、脂肪代谢和免疫功能具有调节作用[2-5]。商常发等[6]研究了肉仔鸡骨骼、肌肉、脑组织中硼的含量。动物机体可以通过食物和饮水来获取硼，摄取的硼能快速吸收进入体液。目前有关硼对肉鸡免疫功能影响的研究较少。试验在肉鸡饮水中添加不同剂量的硼，研究硼对肉鸡免疫功能的影响，探讨硼的最佳添加剂量。

1 试验材料与方法

1.1 试验动物

600只1日龄健康AA肉仔鸡购自郑州正德牧业种鸡场。

1.2 试验试剂

硼酸(AR)、氯化钠(AR)和乙醇(AR)均购自国药集团化学试剂有限公司。

1.3 基础日粮

基础日粮为玉米-豆粕型，参考《鸡饲料标准》(NY/T33-2004)进行配制，基础日粮的组成及营养水平见表1。

1.4 试验设计

试验采用单因子完全随机设计。试验设置5个组：对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组，每组6个重复，每个重复20只，共600只。对照组饮用自来水(硼含量0.17 mg/L)；试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组饮水中硼添加量分别为40 mg/L、80 mg/L、160 mg/L、320 mg/L，试验期42 d。

1.5 饲养管理

试验鸡舍为密闭式鸡舍，试验鸡采用3层立体式笼养，自由饮水，自由采食。及时清理粪便，保持鸡舍内清洁卫生。鸡舍消毒和鸡的免疫按照常规程序进行。

1.6 指标的测定方法

21 d、42 d时，从各重复组中随机选取5只体重接近的肉鸡，空腹称重。采用一次性采血促凝管，每只鸡翅下采血10 mL。颈静脉放血处死后取法氏囊、胸腺和脾脏，称重并计算免疫器官指数，器官指数=器官重(mg)/活体重(g)。为促凝血，3000 r/min离心5 min后，取上层血清，于-20 ℃保存，采用间接酶联免疫吸附分析法测定血清免疫球蛋白含量。

表1 基础日粮的组成和营养水平 %

(2)粗蛋白质和钙的含量为实测值，其它为计算值

1.7 试验数据的统计分析

数据采用SPSS 20.0软件的one-wayANOVA进行单因素方差分析，数据以平均值±标准差表示。差异显著时，用Duncan氏法进行多重比较。

2 结果与分析

2.1 饮水中添加硼对肉鸡免疫器官指数的影响

饮水中添加不同剂量硼对肉鸡胸腺指数、脾脏和法氏囊指数的影响结果见表2。由表2可知，试验Ⅰ、Ⅲ组鸡胸腺指数在试验21 d时与对照组相比，差异不显著(P>0.05)，试验Ⅱ、Ⅳ组表现差异显著(P<0.05)，但在试验42 d时Ⅰ、Ⅳ组差异性不变，试验II组与对照组相比差异不显著(P>0.05)，试验Ⅲ组与对照组相比差异显著(P<0.05)；试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组鸡脾脏、法氏囊指数在试验21 d时与对照组相比差异不显著(P>0.05)，试验Ⅳ组与对照组相比差异显著(P<0.05)。但在试验42 d时，试验III组与对照组相比，由差异不显著变为差异显著；其它组与对照组相比，差异性不变。

试验结果可知，饮水中添加硼剂量为80 mg/L，能显著提高肉鸡胸腺指数，而对脾脏和法氏囊指数影响不大；添加低剂量硼使鸡胸腺、脾脏和法氏囊指数略有升高，而高剂量添加使胸腺、脾脏和法氏囊指数明显降低。

表2 饮水硼对肉鸡免疫器官指数的影响 mg/g

2.2 饮水中添加硼对肉鸡血清免疫球蛋白的影响

饮水中添加不同剂量硼对肉鸡血清中IgA、IgG、IgM有不同程度的影响，结果见表3。由表3可知，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组IgA含量在试验21 d时，与对照组相比差异不显著(P>0.05)，试验Ⅳ组差异显著(P<0.05)；在试验42 d时，试验II组IgA含量与对照组相比,由差异不显著变为差异显著，其它组与对照组相比,差异性不变；试验Ⅱ、Ⅳ组IgG含量在试验21 d时与对照组相比差异显著(P<0.05)，试验Ⅰ、Ⅲ组差异不显著(P>0.05)，在试验42 d时，试验Ⅲ组与对照组相比差异显著(P<0.05)，其它组与对照组相比差异性不变；试验21 d时，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组IgM含量与对照组相比均差异不显著(P>0.05)，42 d时，试验Ⅱ、Ⅳ组与对照组相比差异显著(P<0.05)，试验Ⅰ、Ⅲ组与对照组相比差异性不变。

试验结果可知，在饮水中添加适量硼可提高肉鸡血清IgA、IgG、IgM含量，以80 mg/L的添加水平效果最佳。当饮水中硼添加量为320 mg/L时，血清中的各种免疫球蛋白含量与对照组相比显著降低。

表3 饮水硼对肉鸡血清免疫球蛋白的影响 g/L

3 讨论

3.1 饮水中添加硼对肉鸡免疫器官指数的影响

胸腺、法氏囊和脾脏是家禽的重要中枢免疫器官，其中胸腺参与细胞免疫，法氏囊主要参与机体的体液免疫，脾脏是过滤血液和产生免疫应答的重要场所[7-8]。免疫器官指数是机体生长发育情况的反映，也可用于评价机体的免疫功能状态[9]。研究发现，在试验周期内，当饮水中添加低剂量硼时，使得肉鸡胸腺、脾脏和法氏囊指数略有升高，当硼添加剂量为80 mg/L时,能显著提高肉鸡胸腺指数。表明饮水中添加适量硼，可促进鸡免疫器官的发育，提高鸡免疫器官指数。但当饮水中添加高剂量硼时，肉鸡胸腺、脾脏和法氏囊指数明显降低，表明硼的摄入量增加影响了机体对其他微量元素的吸收利用[10]。研究结果与其他学者研究结果相似：如李升和等[11]研究发现,硼中毒后期的鸡耐受量增加，其胸腺得以恢复；商常发等[6]研究表明，硼中毒对免疫器官有抑制作用，影响机体细胞免疫和体液免疫。高含量硼影响免疫器官发育，可能进一步影响机体的代谢和呼吸；且硼可结合儿茶酚胺及肾上腺素，使免疫器官丧失免疫作用。Armstrong 等[12]研究结果发现，硼能影响巨噬细胞Fc受体、白细胞介素6，并能促进肿瘤坏死因子α和γ干扰素的表达。硼还能通过影响机体内部分激素的水平进调节机体内糖类、蛋白质等的代谢。综上所述，硼可能影响蛋白质和无机盐等营养物质代谢从而增加淋巴细胞和免疫器官的发育。

3.2 饮水中添加硼对肉鸡血清免疫球蛋白的影响

动物血清中含有大量的免疫球蛋白，免疫球蛋白参与机体的体液免疫，以此来抵御外源病原体的入侵。其它多种微量元素参与免疫球蛋白的合成及免疫表达水平。研究发现，日粮中适量添加硼，可明显提高猪血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和INF-γ的水平[12]，增加血液白细胞的数量和分叶核嗜中性粒细胞的比例，提高抗病能力[13]。研究发现，在试验周期内，饮水中添加适量的硼能提高肉仔鸡血清中的免疫球蛋白，当饮水硼添加量为80 mg/L时可显著提高21 d肉鸡血清中IgG含量和42 d肉鸡血清中IgA、IgG、IgM的含量。但当饮水中添加高剂量硼时，血清中的各种免疫球蛋白含量与对照组相比显著降低，表明一定浓度的硼可促进免疫球蛋白的合成。但硼含量较高时，会影响细胞的正常代谢，这与 Fairbrother 等的研究结果相似。Fairbrother 等[14]研究发现，增加硼的摄入量可促进反嘴鹬的生长，增加血液和中性粒细胞和淋巴细胞的比例以及淋巴细胞对刀豆 A 的增殖活性，进而增强机体免疫功能，这表明硼对机体免疫功能具有明显的促进作用。一方面，硼通过影响机体多种代谢酶的活性，进而提高机体抗氧化酶 SOD 和 GASH-Px 的活性，增强机体抗氧化功能，及时清除免疫器官内的氧自由基，减弱脂质过氧化反应，促进淋巴细胞增殖分化[15，16]。另一方面，硼还参与能量底物的代谢，其与烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)或环腺苷二磷酸(cADP)核糖结合，抑制细胞 Ca2+释放，进而影响淋巴细胞增殖分化[17]。

4 结论

在AA肉鸡饮水中添加适量硼，可以不同程度提高免疫器官指数和血清中IgA、IgG、IgM含量，推荐临床添加量为80 mg/L。