金樱子提取液对H2O2诱导HaCaT细胞氧化损伤保护作用研究

刘盈，何嘉祺，颜秋灿，叶菲菲

(中山大学新华学院药学院，广东 广州 510520)

金樱子(RosalaevigataMickx.,RLM)属蔷薇科蔷薇属常绿蔓性灌木，主要药效成分有氨基酸、多糖、黄酮类、三萜类物质及其衍生物等[1-2]，其成熟果实可入药，味酸、甘、涩，性平，有补血益精，涩肠止泻之效，可增强免疫力、抗菌消炎、抗病毒、抗氧化、保护肾脏、抗心律失常等药理作用[2-3]。相关研究发现，金樱子果实中的水溶性多糖能够消除阴离子自由基，减轻自由基对细胞膜的破坏引起的溶血[4]。现代对金樱子的化学成分和药理作用研究虽多，其对人体表皮细胞抗衰老的相关研究却甚少。本文以H2O2诱导的人角质形成细胞(HaCaT cell)为模型，研究不同浓度金樱子提取液对HaCaT细胞增殖与凋亡作用的影响，并探讨其抗氧化损伤作用与药物浓度的关系，为今后金樱子在延缓皮肤衰老的研究进程中提供理论参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞 人角质形成细胞(HaCaT cell)细胞株购自美国ATCC公司。

1.1.2 药材 金樱子果实购自广州市大参林药房。

1.1.3 仪器与试剂 旋转蒸发仪(上海市贝仑仪器设备有限公司)；超净工作台(青岛海尔公司)；5%CO2培养箱(美国Thermo公司)；-80 ℃低温冰箱(美国Thermo公司)；酶荧光多功能检测仪(美国Biotek公司)；细胞培养板(美国Falon公司)；荧光显微镜(日本Olympus公司)；冷冻干燥机(日本Eyela公司)；离心机(Beckman Coulter公司)。CCK-8试剂盒(美国Biosharp公司)；Hochest33342试剂(美国Sigma公司)；30%H2O2试剂(天津市大茂化学试剂厂)；DMEM培养基(美国Gibco公司)；10%胎牛血清(德国PAN Biotech公司)；PBS粉末(博士德生物)，其余试剂均为国产分析纯。

1.2 方法

1.2.1 金樱子提取液的制备 将金樱子干燥果实去核，刮核毛，打粉40目筛。……