甲基转移酶样蛋白14介导长链非编码RNA EIF3J反义RNA1对胆管癌细胞迁移和侵袭的影响

欧阳柳 郑浩 程文英 陶元平 李慧芬 李小玲 张雷 李勃 郭世伟 胡先贵 金钢

1海军军医大学第一附属医院普外三科，上海 200433；2海军军医大学第三附属医院肝外三科，上海 200433；392493部队医院内三科，葫芦岛 125003；4海军军医大学第三附属医院介入科，上海 200433；592493部队医院门诊部，葫芦岛 125003

胆管癌根据胆管的解剖位置可分为肝内胆管癌和肝外胆管癌，通常确诊晚，常伴有肿瘤血管侵犯和淋巴结转移，导致预后较差[1-3]，患者的5年生存率只有20%～30%[4]。目前为止，胆管癌发生和进展的确切分子机制尚不完全清楚。RNA表观遗传修饰是RNA调节基因表达的化学基础，N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine, m6A)是真核生物信使RNA(messenger RNA, mRNA)中含量最丰富的转录后修饰之一，约占总修饰的50%[5]，其修饰的生成依赖于甲基转移酶样蛋白14(methyltransferase-like protein 14，METTL14)。METTL14是m6A甲基化修饰酶的重要编码器，在多种肿瘤的发生和进展中发挥重要作用[6]。研究表明，长链非编码RNA(long noncoding RNA，lncRNA)在肿瘤细胞的增殖、侵袭和凋亡调控中也起着关键作用[7-10]。lncRNA EIF3J反义RNA1(antisense RNA1，EIF3J-AS1)首次报道在肝细胞癌肿瘤样本中显著上调[11]，并且其表达异常与食管癌和结肠癌等的发生与进展密切相关[12-13]。通过在线数据库GEPIA(http://gepia.cancerpku.cn/)证实METTL14与lncRNA EIF3J-AS1(lnc EIF3J-AS1)在胆管肿瘤组织中表达呈正相关，但METTL14是否直接介导lnc EIF3J-AS1在胆管癌肿瘤中异常表达，从而促进胆管癌的发生仍尚未完全明确。本研究拟探讨METTL14介导lnc EIF3J-AS1促进胆管癌进展的潜在分子机制。

材料与方法

一、胆管癌组织METTL14 mRNA和lnc EIF3J-AS1表达检测

收集2017年9月至2018年12月间海军军医大学第一附属医院普外三科行手术切除并经病理学证实的10例原发性胆管癌患者的癌组织和对应的癌旁正常组织(距离肿瘤组织边缘>2 cm)，其中男性9例，女性1例，年龄(52±8)岁。所……