miRNAs指标在非小细胞肺癌患者血清中的表达及临床意义

王佩瑾，林赟羽

(宁海县第一医院 呼吸科，浙江 宁波 315600)

非小细胞型肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)是最常见的肺癌病理学亚型，主要有腺癌(AC)和鳞状细胞癌(SCC)[1]。早期准确诊断对NSCLC患者的治疗十分重要[2]。miRNAs对细胞发育、分化、增殖和凋亡等生物学和病理学过程有重要影响，在肿瘤中可作为致癌基因(onco-miRNA)和肿瘤抑制miRNA[3-4]。无细胞miRNAs在体液(血浆、血清和尿液等)中可稳定存在，显示了miRNAs作为肿瘤早期诊断标志物的潜力[5-6]。本研究旨在评估5种miRNA(miR-21-5p，miR-30a-5p，miR-126-3p，miR-210-3p，miR-486-5p)在NSCLC患者血清样本中的表达水平及其诊断能力，以期为NSCLC的早期诊断提供依据。

1 材料和方法

1.1 一般资料 收集2009年1月—2013年3月于宁海县第一医院治疗的符合中国原发性肺癌诊疗规范(2015年版)[7]诊断标准的原发性NSCLC患者50例，纳入标准：①均经细胞学检查或病理组织学明确诊断为NSCLC；②均未接受过抗肿瘤治疗，包括放疗、化疗、手术及靶向治疗等。排除患有其他系统疾病患者及孕妇、哺乳期女性患者。NSCLC患者中男38例，女12例；平均年龄(65.9±2.3)岁；根据美国癌症联合委员会第7版原发肿瘤局部淋巴结远处转移分期(TNM)[8]对NSCLC组分类：AC患者14例，SCC患者30例，6例患者肿瘤成分复杂；T1期7例，T2期28例，T3期10例，T4期5例。另选取29例健康个体为健康对照组，其中男23例，女6例；平均年龄(70.1±3.0)岁。本研究经医院伦理委员会批准，所选患者均签署知情同意书。

1.2 血清miRNA水平检测 空腹取静脉血约5 mL于无菌EDTA抗凝管中，室温下静置30～60 min，1 300 g离心10 min，取血清于-80 ℃保存。取血清1 mL加入Trizol 提取总RNA。采用逆转录和实时荧光定量PCR法，检测血清中5 种miRNA表达。逆转录程序：在去核酶PCR 薄管中加入反应物，