NF-κB1 基因启动子-94del/ins ATTG 基因多态性与特发性血小板减少性紫癜的关系

杨占甲，李丽娟

（1 郑州人民医院输血科，河南450000；2 郑州大学第三附属医院检验科）

特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura，ITP)是由于机体产生抗自身血小板抗体而引起血小板减少的自身免疫性疾病[1]，主要以血小板减少、骨髓巨噬细胞增加为特征[2]。目前临床治疗ITP 的药物主要是糖皮质激素，可缓解临床症状，但部分患者对药物不敏感或出现病情复发[3]。因此，对ITP 病因进行深入研究，寻找合适的治疗方法极为重要。NF-κB1 基因位于人类第4 号染色体(4q24)，其基因多态性与多种疾病的易感性相关[4]。LEWANDER 等[5]研究发现NF-κB1-94del/ins ATTG多态性与肠癌易感性相关，韦晓梨等[6]报告NF-κB1-94del/ins ATTG 多态性与抗中性粒细胞胞浆抗体(antineutrophil cytoplasmic antibody，ANCA)相关性小血管炎(ANCA-Associated vasculitis，AAV)发病相关。本研究选择2015年3月—2018年3月在本院诊疗的127 例ITP 患者，检测NF-κB1-94del/ins ATTG 基因型和等位基因频率，分析NF-κB1-94del/ins ATTG 基因多态性与ITP 的相关性。

1 资料与方法

1.1 临床资料 ITP 患者127 例，符合《血液病诊断与疗效标准》第3 版[7]关于ITP 的诊断标准，其中急性ITP 66 例，慢性ITP 61 例。急性ITP 组中男性20例，女性46 例，年龄24～59 岁，平均35.29±9.25 岁；慢性ITP 组中男性18 例，女性43 例，年龄24～59岁，平均35.61±9.37 岁。以同期本院体检健康者130例为正常对照组，其中男性53 例，女性77 例，年龄22～60 岁，平均37.56±9.44 岁。各组研究对象性别、年龄比较，差异均无统计学意义(P＞0.05)。本研究经我院伦理委员会批准，研究对象均知情同意。收集患者入院时红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)、血小板计数(PLT)、血清C 反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)水平等资料。

1.2 NF-κB1-94del/ins ATTG 基因检测方法

1.2.1 试剂与仪器:基因组DNA 提取试剂盒(TIANGEN BIOTECH 公司)，Tap DNA 聚合酶、dNTP(美国Promega 公司)，9700型PCR 仪(美国ABI 公司)。

1.2.2 DNA 提取:采集研究对象肘静脉血3 mL 置于EDTA 抗凝管，常规蛋白酶K 消化，苯酚/氯仿提取DNA 溶解于TE 中，取DNA 进行琼脂糖凝胶电泳以检测DNA 提取情况，其余DNA 于-20 ℃保存。……