白粉病菌侵染条件下小麦酵母双杂交文库的构建及可用性检测

王巧慧，谷建华，郭 欢，吕士凯，吉万全,张 宏

(1.西北农林科技大学农学院/旱区作物逆境生物学国家重点实验室，陕西杨凌 712100； 2.陕西省留坝县种子管理站，陕西留坝 724100)

小麦作为人类主粮之一，为人类提供五分之一的能量营养供给[1]，是全球贸易总额超过其他所有作物总和的经济作物[2]。但由禾本科布氏白粉菌小麦专化型(Blumeriagraminisf. sp.tritici)引起的小麦白粉病造成小麦严重的产量损失，在中国部分地区白粉病可导致小麦高达40%的减产[3-4]。据估计，截至2050年，小麦产量每年需增加2.4%才能满足未来人类的粮食需求，而目前粮食增产仅为0.9%[5]。因此，提高小麦抗白粉病能力、降低白粉病的感染面积和发病程度可有效增加小麦产量。

探明白粉菌的侵染机制和小麦抗病的分子机制，是利用分子技术培育抗病品种的基础。小麦抗病的遗传基础分为单基因抗性和多基因抗性[6]，白粉菌小种的不断变异导致抗病小麦品种抗性丧失，因此，需在抗性基因库中不断发现新的抗性基因。随着基因组测序的快速发展，功能组学研究也成为热门，研究蛋白质功能的其中一个方法就是找出与其互作的蛋白，构建互作网络。大多数蛋白都存在蛋白质-蛋白质相互作用，与之相互作用的蛋白质也被认为参与同一细胞内的相同生物过程，从而对探究未知蛋白质的功能提供线索。酵母双杂交技术是一种可高通量检测蛋白质-蛋白质相互作用的细胞内检测技术[7]，该技术可检测微弱的或是短暂的相互作用，还可以提供对蛋白质稳定和正确折叠所必须的修饰。……