参附强心丸对心肾综合征模型大鼠心肾组织自噬蛋白Beclin-1 和LC3 表达的影响

商丹丹，李 旭，郝 迪，王 蕾，刘 淑

（1.天津中医药大学，天津 301617； 2.天津中新药业集团股份有限公司达仁堂制药厂，天津 300457； 3.天津市医药科学研究所，天津 300020）

心肾综合征是心脏或肾脏由于急性或慢性功能障碍而导致另一器官急性或慢性功能损伤的临床综合征，多以难纠正的心力衰竭或肾功能衰竭为特点［1-2］。中医认为慢性心脏衰竭发展到终末期与心、肾两脏关系最为紧密［3-4］。临床研究显示，从补气温阳角度实现对患者的治疗，从而能够延缓疾病的发展进程［5］。本实验运用实验性CRS 动物模型作为研究对象，采用“益气温阳、活血利水”法代表方参附强心丸作为受试药物，求证了该药调控心肾细胞自噬作用来延缓心肾共损疾病的发展进程。

1 材料

1.1 仪器 电子天平（BSA124S-CW Sartorius 公司，德国），移液枪（Eppendorf 公司，法国），微量加样吸头（北京中衫金桥生物有限公司），－80 ℃低温冰箱（青岛海尔），4 ℃低温冰箱（青岛海尔），高速离心机（Eppendorf公司，德国），电泳仪、凝胶玻璃板、固定夹、垂直电泳槽、转移槽（北京六一仪器厂），转移脱色摇床NMYC-60（泰州诺米医疗科技有限公司）。

1.2 药品与试剂 参附强心丸（天津中新药业集团股份有限公司达仁堂制药厂，药品规格：铝塑薄膜袋，密封包装，阴凉干燥贮藏，每袋装2.7 g，批号7668002；大黄素和大黄分含量不得少于0.21 mg/g；有效期18 个月）；雷帕霉素（1 g，源叶生物，批号 H12J10J79598）；大鼠血管 紧 张 素 转 换 酶 ELISA 试 剂 盒（SAB，EK1009，9J281l）；精氨酸加压素 ELISA 试剂盒（SAB，EK2822，9J281l）；甲 状 腺 素 ELISA 试 剂 盒（SAB，EK1787，9J281l）；细胞裂解液试剂盒（碧云天，产品编号：P00138）；BCA 蛋白浓度测定试剂盒（增强型，碧云天，产品编号：P0010）；……