基于正交试验法优选制何首乌提取工艺

关键词：正交试验;二苯乙烯苷;游离蒽醌;提取工艺

何首乌为蓼科植物何首乌（PolygonummultiflorumThunb）的干燥块根，制何首乌为何首乌的炮制加工品，具有补肝肾、益精血、乌须发、强筋骨、化浊脂的作用[1]。制何首乌作为传统的补益类中药，在临床应用广泛。《中国药典》2020版一部更是收录了包括人参首乌胶囊、乙肝养阴活血颗粒等多种包含制何首乌的中成药。现代研究表明，何首乌中二苯乙烯苷、蒽醌类具有保护神经、改善记忆、保肝、消炎、抗菌等作用[2]。目前对何首乌的研究多集中在药材采收期、产地及饮片的炮制、质量变准、药理活性等方面，鲜有对其提取工艺的研究[3]。本研究以二苯乙烯苷、游离蒽醌为指标，通过考察提取溶剂、提取方法，确定制何首乌的最佳提取工艺，以期为制何首乌的开发提供依据。现报道如下：

1仪器与材料

1.1 仪器

Waters 2695高效液相色谱仪（waters 2996检测器），Agilent C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 µm），AY220型电子天平（精确度为万分之一），sartotius.BP211D型电子天平（精确度为十万分之一），Anke TGL-16B离心机，南京金正教学仪器有限公司RE-201D旋转蒸发器，DHG-9023A电热恒温鼓风干燥箱，江苏国胜实验仪器厂HH-S恒温水浴锅。

1.2 试药

大黄素甲醚、大黄素、二苯乙烯苷，购自瑞芬思生物技术有限公司（批号：D-004-130315、D-029-130401、F-022-130512）。制何首乌饮片由贵州昌昊有限公司提供，产地贵州省从江县，经吴启南鉴定鉴定为蓼科植物何首乌Polygonummultiflorum Thunb的炮制品。甲醇与乙腈均为色谱纯，水为超纯水（实验室自制），乙醇（分析纯）。

2方法与结果

2.1 色谱条件与对照品的制备

色谱条件：固定相为Agilent C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 µm），二苯乙烯苷：以乙腈-水（25∶75）为流动相;检测波长为320 nm。……